DNA sequencing 방법,SDS-PAGE

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DNA sequencing 방법,SDS-PAGE 우수한 레포트로 그림자료 포함
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목차

1.DNA sequencing 방법
2.SDS-PAGE

본문내용

1.우리가 알고자 하는 DNA를 NaOH를 써서 변성 시킨 이후에 에탄올로 급격히 침전시켜서 denaturation 된 DNA를 만든다.

2. 여기에 Sequencing primer를 넣어고 동위원소와 dNTP를 넣고 효소를 넣어서 새로운 DNA가닥을 합성시켜준다.

3.ddNTP가 들어있는 각각의 튜브에 이 DNA를 넣어서 반응이 끝나게 되면 이를 gel electrophoresis시켜서 DNA 서열을 예상할 수 있다.

Sanger’s method,whichis also referred to as dideoxy sequencing or chain termination, is based on the use of dideoxynucleotides (ddNTP’s) in addition to the normal nucleotides (NTP’s) found in DNA. Dideoxynucleotides are essentially the same as nucleotides except they contain a hydrogen group on the 3’ carbon instead of a hydroxyl group (OH). These modified nucleotides, when integrated into a sequence, prevent the addition of further nucleotides. (Speed, 1992).This occurs because a phosphodiester bond cannot form between the dideoxynucleotide and the next incoming nucleotide, and thus the DNA chain is terminated.

참고 자료

없음