AbstractObject: Akalinelysis method를 사용하여 배양된 세포로부터 Plasmid DNA를 miniprep한 후, electrophoresis를 통해 plasmid ... Alkali lysis는 위와 같은 plasmid DNA를 miniprep할 때 가장 보편적으로 사용되는 방법으로, 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 ... 따라서 tris buffer만 있는 EB buffer를 처리하면 silica membrane에 있는 plasmid DNA가 tris buffer에 녹아서 내려간다.Figure 3.
Alkaline lysisbuffer Ⅲ* 5M potassium acetate, glacial acetic acidRenature시키는 산성용액. ... Alkaline lysisbuffer Ⅱ①0.2 N NaOH②1% SDS (sodium dodecyl sulfate)SDS는 ionic detergent로 세포막을 깨는 일을 한다 ... Alkaline lysisbuffer Ⅰ①50 mM glucose②25 mM Tris-Cl, pH 8.0③10 mM EDTAEDTA는 세포벽의 integrity를 유지하는 데 필수적인
buffer Ⅱ : lysis solution으로써 SDS에 의하여 cell membrane 단백질의 고유 전하가 변하게 되어 lipid가 제거되어 cell이 깨지게 된다. ... (pH 8.0)alkaline lysisbuffer Ⅰ : EDTA를 첨가하여 cell wall의 Mg2+를 chelating 하여 cell wall을 깨지기 쉬운 상태로 만들어 ... : NaCl이 genomic DNA를 변성시키고 TE buffer는 buffer로써의 역할을 한 다.① 10 mM Tris-Cl (pH 8.0)② 0.1 M NaCl③ 1 mM EDTA