[생명과학기법] Southern blot, Nothern blot, Western blot

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생명과학기법 리포트 입니다.

목차

[Southern blotting]
[Northern blotting]
[Western blotting]

본문내용

[Southern blotting]
Genomic DNA를 cloning하지 않은 상태에서 특정 염기서열의 localization등에 관한 연구를 하기 위한 방법으로 개발된 것으로 유전자의 구조를 알아보는데 유용하게 사용되고 있다. 1975년 Edinburgh의 E.M. Southern이라는 사람에 의해 고안되었다. Genomic DNA를 추출하여 이를 하나 또는 여러 가지의 제한효소로 절단한 후에 agarose gel electrophoresis를 한다. 그리고는 알칼리 조건에서 변성시키고 이를 solid support로 transfer한 후 labeled probe와 hybridization을 시켜서 결과를 얻는 방법이다. 첫 번째 단계에서 genomic DNA를 추출해야 하는데 이때 genomic DNA는 매우 잘 끊어지기 때문에 조심해야 한다. 두 번째 단계로 제한효소를 처리해서 다양한 band pattern을 얻어야 하는데 이 과정에서는 여러 종류의 효소로 잘라보게 된다. 그리고는 agarose gel electrophoresis를 수행하여 크기에 따라 band를 분리시키고 gel 사진을 찍어 두는데 이 때 gel 옆에 transparent ruler를 두고 찍어야 한다. 이는 loading한 well로부터 band간의 거리를 확인해야 어느 band가 원하는 서열을 포함하고 있는지를 알 수 있기 때문이다.

참고 자료

없음