RNA Extraction

소개글

자연과학, - RNA 추출에 관한 리포트

목차

1. 실험의 목적

2. 실험 재료 및 방법

3. 결과 및 고찰

본문내용

1. 실험목적

: 정상세포와 암세포간의 유전적 차이가 있을 것으로 간주되므로 그 차이를 비교하기 위하여 RNA를 추출한다. DNA를 사용하지 않는 이유는 DNA에는 exon을 포함하여 intron 이라는 발현에 관여하지 않는 부분이 존재한다. 그러나 RNA에는 유전자 발현을 담당하는 exon만이 존재하므로 DNA보다 더 명확하게 유전적 차이를 비교할 수 있다.

2. 실험방법

1) 재료준비

① - 자궁근종 세포 : 양성종양, estrogen에 의해 생성되며 자궁 내 평활근의 근육이 이상적으로 뭉펴서 딱딱하게 변한 종양
- Trizol : 세포막을 부숴줌
- chloroform : 단백질을 변성시킴
- 70% Et-OH : 소독작용
- Isopropanol : H20와 RNA 사이의 수막현상을 막아 RNA를 엉기게 해줌
- DEPC(Diethylpyrocarbonate)water : RNA 변성을 막아줌

② Centrifuge, 1.5mL tube, sonicator(cell일 경우), homogenizer(tissue일 경우)

2) 실험순서

(1) Homogenization

① - tissue : 50-100mg의 조직에 1mL의 Trizol을 첨가
- cell : 100Φ dish 에 Trizol 1mL을 첨가→ scraper로 cell을 모은다. (본 실험 사용)
: Trizol의 양이 부족하면 RNA가 DNA에 의해 오염 될 수 있다.

② 그 후 sonicator로 세포막을 다시 한 번 더 부숴준다. (3sec 이내)

참고 자료

없음