십자화과 채소의 glucosinolate 생성에 관여하는 SGT(s-glucosyltransferase), SGT protein의 대량 합성을 통한 Glucosinolate의 생합성량 증가를 위한 실험

소개글

십자화과 채소의 glucosinolate 생성에 관여하는 SGT(s-glucosyltransferase), SGT protein의 대량 합성을 통한 Glucosinolate의 생합성량 증가를 위한 실험

목차

국문요약

제1장 서론
제1절 연구배경
제2절 연구목적

제2장 실험 재료 및 방법
제1절 실험 재료
1)Prep(plasmid isolation)
① Solution I
② Solution II
③ Solution III

2) restriction

3)C-cell 제조
① DH5- alpha 균
② 항생제로 처리된 배지

4) PCR 과정

5)elution
① 전기 영동 장치
② 완충액
③ Gel loading buffer

제 2절. 실험 방법
1) Prep(plasmid isolation)
2) restriction
3) Competent cell의 제조를 통한 transformation
① c-cell의 제조
② 형질전환
4) PCR(polymerase chain reaction)
① DNA의 변성(denaturation)
② Primer의 결합(annealing)
③ DNA의 합성(polymerization)
5)Elution
6)Ligation
7) DNA sequencing

제3장 결과 및 고찰
1) pBX restriction 과 PCR 확인
2) Elution 확인
3) Ligation 확인
4) Transformation
5) PCR detection 및 Recombinant DNA 의 Restriction 결과

Abstract
인용문헌
참고문헌

본문내용

제2절 연구 목적

신체의 자연적 항암방책을 강화해주고 암 발생의 위험성을 줄여주는 물질인 sulforaphane의 새로운 원천이 존스 홉킨스 대학 연구진에 의해서 발견되었다. 싹이 튼지 3일된 브로콜리에서, 다 자란 브로콜리 이삭에서 발견되는 양의 20에서 50배 정도의 화학방어물질이 발견되어 간단하게 음식으로 암을 예방할 수 있을 것으로 기대되고 있다.

Paul Talalay 박사가 이끄는 연구팀은 브로콜리 싹에서 얻은 추출물을 5일 동안 20마리의 암컷 쥐에게 먹이고, 발암 물질 dimethylbenzanthracene에 노출시켰다. 그 결과, 추출물을 먹은 쥐들은 먹이지 않은 대조군에 비해 종양 발생률이 낮았고 종양에 걸리더라도 암의 진행이 느렸다.

십자화과 채소들은 초식동물로부터 자기자신을 보호하기 위해 glucosinolate/myrosinase System을 사용한다. 이때 glucosinolate는 식물체내의 생물학적 과정에 의해 분해되어 항암물질인 isothiocyanate를 생산하는데 관여한다.

즉, 십자화과 채소 및 이들 채소에 함유된 일부화학물질 (chemical compounds)들이 발암(carcinogenesis)에 대해서는 방어 효과(chemoprotection)를 나타내며, 특히, 해독효소로 작용하는 phase Ⅰ 및 phase Ⅱ 효소들이 활성이 유도된다고 알려져 있다. 특히, 설퍼라판 (sulforaphane, S-methylsulfinylbutyl isotiocyanate)은 isothiocyanates의 일종으로 phase Ⅱ 효소들 (글루타치온 S-트란스퍼라제, glutatione S-transferase, GST)의 활성을 유도하지만, 발암전구체를 발암원으로 활성화시키는데 관여하는 일부 phase Ⅰ 효소는 유동하지 않는다. 따라서 최근에는 sulforaphane을 함유하는 십자화과채소의 chemoprotection에 관한 관심이 집중되고 있다.

참고 자료

1. 분자생물학 연구 방법론 11, 경기대학교 연구 지원팀, 윤병수, 1999
2.http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning
3. Dietary Intake of Isothiocyanates: Evidence of a Joint Effect with Glutathione S-Transferase Polymorphisms in Lung Cancer Risk , The University of Texas M.D. Anderson Cancer Center, Houstom, 2000
4.십자화과채소의 황화합물과 항발암효소 유도 효과 , 충남대학교 식품영양학과 교수 김미리
5.Plant Physiol. 1994 May;105(1):425-433. Related Articles, Links
Immunopurification and Immunocharacterization of the Glucosinolate Biosynthetic Enzyme Thiohydroximate S-Glucosyltransferase.
GrootWassink J, Reed DW, Kolenovsky AD.
6.Dietary Intake of Isothiocyanates: Evidence of a Joint Effect with Glutathione S-Transferase Polymorphisms in Lung Cancer Risk , The University of Texas M.D. Anderson Cancer Center, Houstom, 2000)