mini preparation

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목차

1. Date
2. Title
3. Objective
4. Introduction
5.Materials&Methods
6. Result
7. Discussion
8. Futher Study

본문내용

4. Introduction
Plasmid/DNA 분리정제는 total cell DNA 분리의 일반적인 분리방법과 같다. Plasmid를 지니는 세포를 액체배지에서 배양하여 수확하고 세포를 추출해내면 된다. 그러나 total cell DNA 분리와 Plasmid 정제와는 중요한 차이점이 존재한다. Plasmid/DNA 분리정제는 일반적으로 많은 양의 Chromosomal DNA로부터 분리하여야 하며, Plasmid DNA와 Bacterial DNA의 구조적 차이로부터 분리된다. 가장 큰 플라스미드의 길이는 E. coli 의 염색체 길이의 8% 밖에 되지 않으며 대부분이 작다. Plasmid와 염색체는 처음에는 구형인데 염색체는 추출하게 될 때 구형에서 선형조각으로 깨어지며 Plasmid는 구형으로서 변화가 없다. 이 구조적인 차이점을 이용하여 Plasmid를 정제하는 방법을 습득해야한다. Plasmid DNA는 평판 또는 액체배지에서 배양되는 E.coli로부터 획득할 수 있는데, Bacterial cells은 Triton X-100/LiCl과 phenol/chloroform을 처리하여야만 한다. 이것은 plasmid DNA의 가용성화와 chromosomal DNA, cellular debris등에 침전을 일으킨다. debris는 원심분리를 통해 제거할 수 있다. 이러한 분리절차로 chromosomal DNA 등을 제외한 plasmid DNA만을 얻을 수 있다.
DNA는 RNA와 마찬가지로 핵에서 처음으로 분리되어 핵산이라고도 하지만 핵외의 다른 곳에서도 존재하고 있다. DNA는 생체에서 유전자로서의 역할을 하며 Deoxyribonucleotide로 구성된 실과 같이 아주 긴 고분자 물질이다. 구성 성분인Purine (Adenine, Guanine)이나 Pyrimidine (Cytosine, Thymine)기는 유전 암호를 가진 부분이고 당과 Phosphate는 DNA 구조 형성에 관여하는 부분이다. 1944년 O. Avery에 의해 DNA가 유전물질임이 밝혀진 후 유전학, 분자생물학 등의 과목은 눈부시게 발전하여 현재는 DNA 조작기술이 그 나라 과학 발전의 척도를 가늠할 정도에까지 이르고 있다.

참고 자료

없음