오징어젓갈의 Citrobacter 유무 측정 실험

소개글

Citrobacter의 검출 실험 입니다.
도움되시길 바랍니다...

목차

1. 원리
2. 목적
3. 실험기구 및 배지
4. 실험방법
- 오징어 젓갈의 Citrobacter 유무 판정 미생물 시험(분리배양, 확인시험)
-Chromocult Coliform Agar를 이용한 Citrobacter의 유무 판정 시험
-Rambach® Agar를 이용한 Citrobacter의 유무 판정 시험
5. 실험결과

본문내용

1. 배지제조
① EC broth : EC Broth 36g을 증류수 1000ml에 녹여 pH 6.9±0.2 로 조정하여 시험관에 분주하여 발효관을 넣은 후 121℃에서 15분간 멸균한다.
② MacConkey Sorbitol agar : MacConkey Sorbitol agar 50g을 증류수 1000ml에 녹여 pH 7.1±0.2로 조정한 후 121℃에서 15분간 멸균한다.
③ EMB 한천배지 : EMB agar base 36.96g을 증류수 1000ml에 녹여 pH 6.8±0.2로 조정한 후 121℃에서 15분간 멸균한다.

2. 실험
① 증균배양 : 무균적으로 채취한 시료 25g을 EC broth 225ml에 접종하여 37℃에서 24시간 증균배양한다.
② 분리배양 : 증균배양액을 MacConkey Sorbitol Agar에 직접 또는 적절히 희석하여 도말하고 37℃에서 24시간 배양한다.
③ 확인시험 : Sorbitol을 분해하지 않는 무색집락을 취하여 EMB 한천배지에 획선배양하고 37℃에서 24시간 배양한다. 녹색의 금속 광택 집락에 대해 API 20E kit를 이용하여 생화학 시험을 하고 결과를 관찰한다.

<실험결과>
시료를 EC broth에 증균배양하고 MacConkey Sorbitol Agar에 분리배양 후 EMB Agar에 획선으로 도말한 결과, 녹색의 금속성 광택을 지니는 집락은 발견할 수 없었다. 정확한 실험을 위해 약간의 의심이 가는 집락을 따서 API 20E kit에 접종하여 결과를 관찰해본 결과는 다음과 같았다.

API 20E kit에서의 생화학적 반응 결과는 Citrobacter의 그것과 일치하지 않았다. Citrobacter속 균은 lysine decarboxylase, inositol fermentation/oxidation 반응에서 음성이 나와야하지만 실제 실험결과는 양성이었으며, citrate utilization와 arabinose fermentation/oxidation 반응은 양성이 나와야 하지만 음성이 나왔다.

참고 자료

없음