진단분자유전학

소개글

진단분자유전학

목차

1. 진단분자 유전학 기법들
2. 감염성 질환의 분자병리
3. 혈액종양의 분자유전학적 방법

본문내용

1. 진단분자 유전학 기법들

1) Southern 분석과 기타 기법들
(1) Southern 분석
단계
① DNA추출
② 제한효소로 처리하여 DNA 절단
③ 전기영동
④ 나일론 막이나 nitrocellulose막으로 옮기는 blot시행
⑤ 방사성동위원소 또는 digoxigenin 등에 표지된 소식자(probe)를 나일론이나 nitrocellulose 막의 DNA에 교잡시킨 다음
⑥ 감광시키거나 발색 반응 이용하여 소식자와 결합된 DNA조각의 크기와 강도를 판독
제한효소마다 각각 특정한 염기서열을 가진 이중가닥 DNA를 절단하며 이 부위를 제한부위 (restriction site)라고 한다.
(2) 기타 blot 방법들
① Northern blot
대상 RNA
② Western blot
단백질을 특정 단백질 항혈청과 반응시켜 그 단백질의 유무 및 양을 분석

2) 중합효소 연쇄반응과 기타 증폭기법들
(1) 중합효소연쇄반응 (Polymerase chain reacton)
기본 시약 : 주형 DNA, 한쌍의 oligonucleotide, Taq polymerase, deoxynucleotide triphosphates (dATP, dCTP, dGTP, dTTP; 이하 dNTP), MgCl2, KCl2
단계 : 변성 (denaturation) : 주형 DNA가 단일 가닥으로
annealing : primer가 주형 DNA의 상보적인 부위에 결합
extension : Taq polymerase가 결합된 primer를 시점으로 대응하는 핵산을 합성
28-35주기 후 105-106
미량의 DNA로 실험가능, 수 시간 정도로 신속, 방사능 물질을 사용하지 않아 안전
단점 : 큰 크기의 DNA는 분석이 어렵고 , DNA염기서열을 알고 있어야 하며, 오염되기 쉽다.

참고 자료

없음