실험-PCR을 하기 위한 준비

소개글

생리학 실험중 PCR을 하기위한 예비 보고서 입니다.
성심성의것 작성했어요.

목차

1. PCR이란?
(1) DNA변성(Denaturation)
(2) Primer의 Annealing
(3) 신장(Extension)
(4) Cycle 수
2. Primer
1) Sequence
2) Primer 만들 때 고려할 점
3) 주의사항
3. DNA 추출
4. 주의사항
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

5. 고찰
우리가 만든 primer의 GC결합은 Forward primer일 때 엔자임을 포함하면 37.14%, 포함하지 않으면 37.93%이다. Reverse primer에서는 엔자임을 포함하면 32.35%이고 제외하면 25%이다. 제한효소는 왼쪽과 같은 모습으로 잘리게 된다. Forward primer에서는 BglⅡ가 Reverse primer에서는 PstⅠ이 엔자임으로 붙는다. 양쪽에서 저런 모습으로 잘리게 되기 때문에 8bp가 차이가 난다. 우리가 만든 primer는 Fed8에 넣을 것이다. 이번에 primer의 위치에 대해 자세히 공부하게 되었다. 그리고 다시 DNA의 결합에 대해서도 생각해 보는 계기가 된 것 같다. 유전학 시간에 배웠던 이론을 실험에 도입해 보니 조금은 생소한 느낌이 있었다. 하나의 실험을 하기 위해서 많은 시간이 필요하고 많은 변수가 존재한다는 것을 알았다. 특히 오염되는 상황이 발생하기가 매우 쉽다는 것을 알았다. 물론 연구실에서 제대로 한다면 그렇지 않겠지만 현재 우리 상황에서는 오염되는 것이 가장 심각한 문제 같다. 작년 미생물 실험 때 PCR을 하고 전기영동까지 해본 적이 있다. 하지만 결과에는 PCR이 전혀 되지 않은 것으로 나왔었는데 아마도 DNA 추출과정에서 실수가 있었던 것 같다. 물론 이번과 같은 방법으로 하지는 않았지만 제대로 했다고 생각한 나에게 있어서는 큰 충격이었다. 이번 실험에서는 꼭 성공하고 싶은 마음이다. 하지만 상층액과 침전물을 분리하는 과정에 있어서 과연 얼마나 해야 하는지 정확하게 정해진 것이 아니라 개인이 하기 때문에 많은 실수가 나올 것 같다. 그리고 시간 또한 제대로 맞추면서 한 것이 아니라 실패가 될 가능성이 있다.

참고 자료

http://old.medric.or.kr/educateNews/popup/20901_2.html
양재섭외 16명 역, 2004, 필수 유전학, 월드 사이언스, p.234~239