영구프레파라트 제작 레포트
- 최초 등록일
- 2008.03.28
- 최종 저작일
- 2008.03
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소개글
영구 프레파라트 제작레포트입니다.
목차
1. 제목
2. 날짜
3. 조,조원
4. 실험목적
5. 원리
6. 실험재료및 기구
7. 실험방법및 과정
8. 고찰
9. 느낀점
10. 참고문헌
본문내용
*영구 프레파라트 제작법
1. 고정(Fixation) : 이 과정은 수축 팽창 없이 있는 그대로 고정 관찰하기 위해서이다. 생물의 조직이 살아있을 때와 같이 원형질의 구조를 보존, 유지하면서 세포를 죽이는 과정으로 이때 사용하는 시약은 FAA(Formalin, Acetic Acid Alcohol)이다.
수세(Washing): 0.01M phosphate buffer( 어떤 고정액을 사용했더라도 Phosphate buffer 를 사용함). Three changes in 24 hrs at 4 ⁰C.
먼저 fixation 고정, 내가 받은 샘플은 간샘플이었다. 면도칼로 0.5cm정도로 잘라 낸후 프레파라트와 슬라이드를 5개씩 준비한다. 페니실린병에 FAA 고정액을 넣고 한 병을 고정시킨 단계에서 멈춘후 aspiration 공기를 빼낸다.(최소 12h) 고정이란 살아 있는 상태를 변화시키지 않도록 죽이고 동시에 염색하기 쉽게 하는 조작을 말한다. 알코올, 포르말린, 승홍, 피크린산 등 여러 가지 약품을 목적에 따라 여러 가지로 처방한 것을 사용하며 재료를 일정 시간 동안 고정액에 담가 놓는다 FAA fixation은 paraffin embeddment의 목적으로 주로 사용되며 식물의 줄기나 굵은 뿌리 등 주로 조직이 클 경우 많이 사용된다. 연하고 작아서 상하기 쉬운 조직의 경우는 glutaraldehyde fixative의 사용을 시도하기도 한다. 고정시간은 조직에 따라 다를 수 있으나 대부분 12 시간을 하며 장시간 보관을 위해서는 4℃에서 행한다.
고정의 목적은 세포 또는 조직의 형태를 가능한 한 살아 있는 것에 가까운 상태에 보존해야 하며, 목적으로 하는 피검물을 가용화 시키지 말고 그 본래의 소재부에 보존시켜야 한다. 따라서, 이러햔 고정을 위해서는 pH, 삼투압, 온도, 고정액의 양, 조직의 크기 등이 중요한 요인이 되며, 고정액은 생물체 또는 그 일부를 고정하기 위한 시약이다.
참고 자료
1. 일반 생물학 실험서> 강영선, 탐구당, pp. 35~37
2. 인체 조직학 박경한 외 28명 , 정문각 , pp. 236, 299
3. <대학생물 실험서> 이연태 외 13명, 탐구당, pp. 82~93
4 <필수 세포 생명학> Bruce Alberts 외, (주)교보문고, pp. 225~229
5. 식물 형태 해부학 실험> 김우갑 아카데미 서적 pp. 63~79