[분석실험] HPLC 분석 (고성능 액체 크로마토그래피)

소개글

고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC ; High Performance Liquid Chromatography)란 혼합된 시료 성분이 이동상과 고정상 사이를 흐르면서 흡착, 분대 등에 의해 각각의 단일 성분으로 분리되게 하는 Chromatography 이다.
HPLC는 매우 작은 지름의 효율이 좋은 입자로 채워진 column을 사용하며 적당한 충진재를 채운 고정성의 관속에 높은 압력으로
.
.

목차

1. 실험목적
2. 실험재료 및 방법
(1) 실험재료
(2) 실험방법
3. 실험 결과
4. Discussion
5. Reference

본문내용

2. 실험재료 및 방법

(1) 실험재료

① HPLC 기기 :
Solvent Reservoir, Filter, Pump,LcNET BOX, Injection Port, Column, Column oven, Detector, computer
② caffeine 용액 (100㎍/㎖), 증류수
③ methanol

(2) 실험방법

① 100㎍/㎖ caffeine 용액을 이용하여 5, 7.5, 10㎍/㎖ 의 caffeine 용액을 만든다.
② HPLC 기기를 컴퓨터로 세팅한다. (주입량 0.2ml, 시료이름 등)
③ methanol로 한번 루프를 씻어준 다음 시료를 load 한다.(0.2ml 이상)
④ Auto Zero 누른다음, wait 램프 꺼지면 Injection으로 레버를 돌린다.
⑤ 컴퓨터에 표시되는 chromatogram의 모양과 면적을 확인한다.
⑥ 주사기를 methanol로 씻어준 뒤 다른 시료도 같은 방법으로 실험한다.
⑦ 3개의 시료를 모두 실험한 뒤 농도에 따른 peak 면적을 비교한다.

참고 자료

1. David Harvey, 박면용외 역, Modern Analytical Chemistry, 녹문당, 2001, p.543∼621
2. 이용근외 5인, 분석화학, 4th Edit, 희중당, 1992, p.157∼201
3. http://hplc.chem.shu.edu/HPLC/index.html