단백질영동과 gel staining / transfer

소개글

생명과학 - 생화학 단백질영동 레포트입니다.

목차

1. 전기영동결과 (사진 첨부)
2. Excel 또는 기타 프로그램을 이용하여 prestained marker의 크기와 이동거리를 이용하여 표준곡선(prestained curve)을 그리고 추세선의 공식을 찾으시오.
3. 얻어진 추세선의 방정식을 이용하여 band의 굵기가 큰 순서로 5개를 선택하여 크기를 계산하시오.
4. 얻어진 결과의 단백질들 중에서 특징적으로 변화를 보여 주는 단백질이 있습니까? 있다면 그 단백질의 특징에 대해서 설명하시오.
5. 문제
6. 결과와 고찰

본문내용

4. 얻어진 결과의 단백질들 중에서 특징적으로 변화를 보여 주는 단백질이 있습니까? 있다면 그 단백질의 특징에 대해서 설명하시오.
MB, MT의 밴드를 관찰하면 주로 굵은 띠의 밴드가 아래쪽에 몰려있는 것을 알 수 있다. 그리고 위쪽으로 갈수록 밴드의 크기가 작아지고, 시작부근에 굵은 띠가 존재한다. 아래 쪽에 있다는 것은 이동거리가 멀다는 것인데, 크기가 작을수록 멀리 이동 할 수있다. 주로 40mm, 35mm, 30mm 세 띠에서 굵은 지점을 발견 할 수 있다. 근원세포는 미오신과 액틴이라는 단백질로 구성되어있다. 미오신은 분자량이 약 50만 돌턴, 액틴은 약 54000돌턴으로 두가지 부분으로 나눌 수 있는데 이 것으로 보아,아래쪽의 굵은 부분은 액틴, 위쪽의 굵은 부분은 미오신이라 할 수 있겠다.

5. 어떤 연구자가 170 kDa의 비교적 큰 단백질의 특성을 알아보는 실험을 하기 위해 전기영동을 하였습니다. 10% gel에서 전기영동 한 결과 170 kDa 부근에 단백질 밴드가 여러 개 있어 분별해내기 힘들었다면 알아보고자하는 크기의 단백질을 효과적으로 식별하기 위해 전기영동의 조건을 어떻게 변화시키면 될까요?
전기영동은 저농도에서 할수록 좀 더 자세한 단위를 얻을 수 있다. 고농도의 경우 구하고자 하는 단백질 kDa의 범위가 넓지만 저농도일수록 선택 범위가 줄어든다.(ex : 15% 4~ 100kDa, 10% 20 ~ 200kDa, 5% 100 ~ 300kDa) 10% gel에서 전기영동을 할 때 170 kDa 부근 단백질 밴드가 여러개 있을 경우 저농도(약 7.5%정도) 에서 한다면 170kDa부분이 더 덟은 구간으로 10%보다 밴드가 분산되어 쉽게 분별 할 수 있을 것이다.

참고 자료

없음