[자연과학]in situ hybridization

소개글

in situ hybridization의 정의 특징 종류 등, 사진첨부되어있습니다.

목차

1. subject
2. introduction
(1) in situ hybridization
(2) in situ hybridization하는 일반적인 과정
(3) in situ hybridization의 장단점
(4) In situ hybridization만의 다른 hybridization을 이용한 기술과
다른 독특한 특징들
(5) In situ hybridization의 종류

본문내용

(1) in situ hybridization
- 염색체나 세포 또는 조직 단편에서 직접적으로 특정 nucleic acid sequence를 detection하는 technique
- detection 하고자 하는 messenger RNA와 상보적인 sequence를 갖는 probe를 제작하여 in situ hybridization
→ 다양한 생물체의 다양한 조직에서의 gene expression을 확인가능 하 다.
→ 시간, 공간, 특정 조건에 따른 gene expression의 pattern을 확인가능 하다.
- In situ hybridization이 고안된 초기에는 mRNA의 양이 많을 경우에만 detection이 가능 했지만, 현재는 기술의 발달로 아주 적은 양의 mRNA 도 detection이 가능 해졌다.
- 기본적인 원리
① 우리가 원하는 mRNA와 상보적으로 결합이 가능한 probe를 이용해서 hybridization
② hybridization된 것을 여러 가지 방법을 통하여 관찰하는 것이 가능하 다.

(2) in situ hybridization하는 일반적인 과정
- membrane으로 cell을 transfer
- cell의 lysis
- DNA를 membrane에 binding
- DNA의 denaturation
- 방사성 동위원소 또는 enzyme등이 label되어있는 probe
hybridization
- signal detection
→ 방사성 동위원소 : X-ray film에 노출
→ enzyme : 기질과 발색시약을 첨가하여 반응

참고 자료

- Molecular Biomethods Handbook / John M. Walker외 / 1998 Humana press / pp.697-715
- Nucleic acid and hybridization-a practical approach
B.D. Hames외 / 1988 / IRL press / pp.179-182
- http://bio.kaist.ac.kr/~stlee/micro/2003
- http://bk21-medsci.yonsei.ac.kr/admin/bbs/bbsdata/15