[생명과학]TTBS와 NBT/BCIP 원리

소개글

western blot 과정에 사용되는

TTBS와 NBT/BCIP의 구조와 원리를 설명하고 있습니다.

목차

TTBS
NBT/BCIP

본문내용

TTBS
TTBS(Tris-buffered Saline with tween-20)는 membrane의 nonspecific한 antibody를 제거하기 위한 wash에 사용되는 buffer이다.
Components
Concentration
Note
Tris-HCl (pH 7.4)
100mM
사용 시에는
1X로 희석하여 사용
NaCl
1.5M
Tween-20
0.5%
표 . Composition of TTBS (10X)

components의 concentration은 달라질 수도 있다.


여기서 Tween-20에 대해 알아보면 Tween은 Uniqema라는 미국 회사에서 만든 상품명이고 polyoxyethylene sorbitan에 지방산이 붙어있는 계면활성제로 주로 poly(ethylene glycol)의 친수성 그룹과 탄화수소의 소수성 그룹이 섞여있는 detergent로서 물과 기름을 섞이게 하는 용도, 또는 세포의 막을 파괴하는 용도 등으로 사용된다. 뒤에 있는 숫자는 소수성 그룹의 종류에 따라서 회사에서 붙인 숫자이다. 숫자가 커질수록 일반적으로 탄소 수가 늘어나기 때문에 소수성이 더 커진다고 생각하면 되지만 정확한 성질은 각각 구조 상 차이를 가지고 비교해야 한다. 결정적으로 protein을 washing하여 떠돌아다니는 antibody를 제거할 때 세척효과를 높여주는 성분이 Tween-20이라고 할 수 있다.

참고 자료

윤석숭, <Ret Finger Protein의 세포내 발현 양상과 결합단백질의 분리>, (이학석사 학위논문, 배재대학교, 2004)
http://www.sial.co.kr/function/order/order.asp?ID=SEARCH&BRAND=ALD&CatNo=274348
http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=110204&eid=l9sq4T6QxeXdAxEXK74Gj1osI8vyGSb/&qb=dHdlZW4tMjA=
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/western_blot.php
http://probes.invitrogen.com/handbook/figures/0637.html