Column chromatography를 위한 다양한 농도의 Tris-HCl buffer 제조

소개글

Column chromatography를 위한 다양한 농도의 Tris-HCl buffer 제조

protein purification을 위한 첫 번째 단계이며
생화학 실험시간에 쓴 report로 A+ 받았습니다~

Buffer solution
몰 농도 (molarity)
pH meter의 사용법

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목차

1. 실험주제
Column chromatography를 위한 1M의 Tris-HCl buffer 제조

2. 실험목표
1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl농도의 elution buffer를 만든다.

3. 실험 도구 및 방법

4. 실험 이론 및 원리

5. 실험결과

6. 토의

7. 참고문헌

본문내용

ⅰ. Tris-HCl 1M을 만들기 위해 먼저 Tris의 분자량(M.W.)을 확인한다.

ⅱ. Tris의 분자량은 121.14 이다. 1M의 Tris-HCl을 만들기 위한 첫 번째 단계
는 1M의 정의에 따라 우리가 필요한 50ml의 Tris-HCl을 위해 비커에 Tris
6.06g을 대략 25ml 정도의 d.w.에 녹인다.
(1M은 121.14g/1l, 따라서 분모와 분자를 20으로 나누면 6.057g/50ml이고 소
수점 세 번째 자리에서 반올림하면 6.06g/50ml이 된다. HCl로 pH를 떨어뜨
려야 하므로 처음부터 용액을 50ml에 맞추지 않는다. 나중에 메스실린더에
Tris-HCl 용액을 넣고 d.w.을 더 넣어 50ml로 맞출 것이기 때문에 정확하게
25ml에 맞출 필요는 없다. )

참고 자료

Oxtoby 외(2004), Principles of Modern Chemistry(5th Ed.), THOMSON
David T. plummev(1993), An introduction to practical biochemistry(2nd Ed.)
http://blog.naver.com/oops114?Redirect=Log&logNo=100035140880
http://blog.naver.com/d5322?Redirect=Log&logNo=70013771732