cloning에 대한 전반적인 개요

소개글

유전공학 시간에 배울 수 있는 gene cloning 방법에 대한 전반적인 개요를 정리하였다.

목차

cloning이란?
gene cloning 방법
주의점

본문내용

cloning이란? → 특정한 유전자를 연구하기 위하여 제한효소와 lygase를 이용하여 vector 에 삽입하여 여러 개로 복제를 하는 기술을 뜻한다. PCR을 하여 증폭을 시 키더라도 많은 양을 증폭할 수는 없기 때문에 cloning을 이용하여 짧은 시 간에 다량으로 복제하는데 이용되기도 한다.

방법 : 원하는 gene을 PCR을 하여 증폭 시킨 후 전기영동을 하여 정확한 DNA를 정제하 여 적당한 vector에 끼워 넣는다. 이 때 gene의 앞, 뒤 부분과 상동한 vector 부분 을 제한효소를 이용하여 절단하고 lygase를 이용하여 gene과 vector를 연결한다. 유전자가 삽입된 vector를 transformation 즉, 박테리아 등의 증식이 빠른 세포의 내부에 주입한다. 만약 prokaryote가 아닌 eukaryote를 이용한다면, transformation대신 transfection이라는 용어를 사용한다.

박테리아를 transformation 시킬 때 다음 그림과 같은 방법을 사용하여 competent cell을 만든다.

참고 자료

없음