[공학]냉동건조 및 균주보관방법

소개글

냉동 건조 조건이 생균에 미치는 영향 및 균주 보관방법과 세포활성

결과보고서

목차

1. 동결건조 전후의 생균수(C.F.U./ml)를 기록하고 생존도를 구하시오.
2. 동결보호제로 어떤 물질이 가장 적합한지 결정한 후, 이유를 설명하시오.

3. 동결건조시 sucrose의 역할과 가장 최적의 농도를 쓰시오.

4. 고찰

본문내용

2. 동결보호제로 어떤 물질이 가장 적합한지 결정한 후, 이유를 설명하시오.
동결보존이란 세포나 조직, 기관, 개체를 장기간 보관하고 이를 다시 해동해서 냉동 이전의 상태로 되돌리려는 방법이다. 이때 핵심은 세포 내에 약 90%를 차지하는 물의 처리이다. 물의 동결과정에서 날카로운 얼음결정을 형성하게 되고, 이로 인해 세포막이 damage를 받아 세포가 죽게 된다. 이러한 특성을 고려해볼 때, 우리가 실험한 동결보호제 중 glycerol이 적합하다. 이는 산이나 염기를 가해도 pH의 변화가 잘 일어나지 않게 하는 용액에 완충작용하고, 균에 영양조성에도 영향을 준다. 세포의 동결 시 얼면서 결정이 날카롭게 얼게 되면 얼음결정에 의해 세포가 damage를 입는데 glycerol이 이를 방지해 준다. 농도는 여러 가지 농도로 사용할 수 있는데 보통은 10~20% 농도로 미생물에 따라 적정하게 사용한다. 이외에 우리가 실험에 사용하진 않았지만, dimethyl sulfoxide(DMSO), prophandiol (PR-OH), ethylene glycol(EG) 등이 있다.

3. 동결건조시 sucrose의 역할과 가장 최적의 농도를 쓰시오.
동결건조시 저온, 탈수 등의 과정으로 세포 일부가 사멸하게 되는데 이러한 손실을 최소화 하기 위한 보호물질 중, sucrose는 건조시료와 수분함량이 과도하게 저하되지 않게 수분 완충제로서 작용한다. 동결건조시료의 보존온도가 높은 경우에는 carbonly기를 가지고 있지 않은 당을 이용하는 것이 좋다. sucrose의 최적 농도는 12% 정도로 실험 결과 생존도에서 10%나 15%에서 높은 수치를 보일 것을 예상하였지만, 결과는 그렇게 나오지 못하였다.

4. 고찰
이전의 실험들에서 미생물의 효소나 미생물을 직접 배양하는 실험들을 다루었는데, 이번 실험에서는 그런 미생물들을 보존하는 방법들 중 하나인 동결건조에 관한 실험을 하였다. 미생물을 여러종류의 동결보호제와 첨가하여 보존한 후 생균수를 계수하는 방법으로 동결전 생균수와 비교하여 생존도를 측정하였다. 결과는 예상했던 것과는 다른 점들이 많이 나왔다

참고 자료

없음