β-Galactosidase purification & activity & SDS PAGE

소개글

β-Galactosidase purification & activity & SDS PAGE
에 대한 실험 리포트

목차

1. Introduction
2. Materials
3. Method
4. Result
5. Discussion
6. References

본문내용

Ⅰ. Introduction
1. Chromatography

1-1) 개요
크로마토그래피는 혼합물로부터 그 성분들을 순수하게 분리하거나 확인, 정량하는 데 사용하는 편리한 방법 중의 하나이다.
크로마토그래피는 크기, 전하, 흡착성 또는 생물학적 친화성(affinity)의 차이에 근거를 두고 미세한 입자를 충전시킨 컬럼을 통하여 유체를 균일하게 침투 통과시키는 과정에서 유체내 어떤 성분이 선택적으로 지연되어 결과적으로 물질이 분리되는 것을 말한다. 생물공정에서 많이 사용되는 것으로 크기의 차이에 근거를 두고 분리하는 겔(gel) 크로마토그래피, 이온교환수지의 흡착성을 기준으로 하는 이온교환(ion exchange) 크로마토그래피, 분자간의 친화성에 근거를 둔 친화성 크로마토그래피가 있다. 이외에도 용질분자와 지지체(matrix) 위의 작용기 사이의 소수성 상호작용에 기초한 소수성 상호반응(hydrophobic interaction) 크로마토그래피, 그리고 크로마토그래피의 일반 원리에 기초한 종이 크로마토그래피, 얇은 막 크로마토그래피, 기체 크로마토그래피, 고성능 액체 크로마토그래피 등 여러 가지가 있다.

1-2) 원리
유리와 철조각 같이 성질이 아주 다른 물질이 섞여있을 땐 자석을 이용하여 쉽게 분리할 수 있다. 모래와 설탕이 섞여있을 땐 설탕은 물에서 녹기 때문에 쉽게 분리할 수 있다. 그러나 만약 섞여있는 물질들의 물리적, 화학적 성질이 유사하다면 분리 방법은 좀더 복잡해질 것이다. 크로마토그래피에서 물질들은 이동상(mobile phase)과 정지상(statoinary- phase)으로 구성되어 있는 계에 놓인다. 그리고 물질들은 두 상에서 그들의 분포가 다르기 때문에 분리되어진다. 각 분자의 상대적 움직임은 이동상의 움직임과 이동상의 움직임 지연효과들 사이의 균형의 결과이다. 이러한 혼합물의 정지상과 이동상에 대한 친화성에 중요한 영향을 미치는 인자는 흡착, 이온화 빛 분배계수들로써 여러 종류의 크로마토그래피는 이들 인자가 서로 합하여 작용하게 된다.

참고 자료

없음