[생화학]닌히드린반응

소개글

아미노산 정성시험을 알아본다

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험재료
4. 실험방법
5. 결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
아미노산 및 단백질의 확인에 쓰이는 닌히드린 반응을 알아보고 이 반응을 이용해서 아미노산이 있는지 확인해본다.

2. 실험원리
이 반응은 α-아미노산, 펩티드 및 단백질은 pH 4~8에서 그리고 100℃ 근처에서 닌히드린과 반응하여 자주색 또는 붉은 자주색의 착화합물을 만든다. 이 착색물질의 색깔은 아미노산에 EK라 다르며 아미노산인 프롤린과 하이드록시 프롤린의 경우에는 황색이다. 일차아민과 NH3도 양성반응을 나타내지만 이때는 CO2가 유리되지 않는다. 그러나 β-아미노산과 γ-아미노산 등은 정색하지 않는다. 이 닌히드린 실험은 매우 예민하기 때문에 아미노산 및 단백질의 확인에 보편적으로 쓰일 뿐 아니라 아미노산의 정량에도 이용된다.

3. 실험재료
1) 시약
아미노산 :
glycine, tyrosine, tryptophan, proline, hydroxy proline
단백질 :
albumin 1% 수용액
Ningydrin :
0.2% 수용액(사용 전에 만들 것)

2) 기구
- 시험관, 삼각플라스크, 실린더, 저울, 시약스픈, water bath, 시험관대, 피펫, 피펫펌프, 파스퇴르 피펫, 라벨지, 초시계, 가열교반기(Hot Plate Stirrer), 시험관믹서, 리트머스시험지(pH 측정용)등

4. 실험방법
① 시약별로 라벨링을 한 50ml 삼각플라스크에 각 각의 시약을 0.01g을 넣는다. 알부민은 0.1g을 넣었다. → 저울을 이용하여 정확하게 넣었다.
② Ningydrin은 100ml 삼각플라스크에 0.2g을 넣고 실린더를 이용 증류수를 100ml을 넣었다.
③ 시약이 들어있는 삼각플라스크에 증류수를 10ml씩 넣고, pH측정용 시험지로 pH의 색을 확인하였다.

참고 자료

없음