[생화학]단백질 정량

소개글

생화학실험
단백질 정량입니다.
A+맞은 자료 입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 시료 및 도구
3. 실험 원리
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고 찰

본문내용

1. 실험 목적
1) Bicinchoninic Acid(BCA)를 이용한 단백질 정량법
2) 단백질 정량을 위한 표준 곡선의 작성
3) 미지시료의 단백질 농도 측정

2. 시료 및 도구
BSA 용액, BCA 시약, 미지시료
Spectrophotometer, Water bath, tube, pipette, 멸균 tip
3. 실험 원리
* 단백질 정량법
1. Kjeldahl 법
Kjeldahl 법은 습식 질소 정량법의 하나로 1883년 덴마크의 J. G. Kjeldahl이 처음으로 보고하였다. 경질의 둥근바닥 플라스크 안에서 진한 황산, 황산칼륨무수물 및 황산구리(Ⅱ), 기타의 분해촉매와 시료를 함께 끓이면 황산의 산화작용으로 유기물은 분해되고, 시료 중의 질소는 암모니아가 되며 다시 황산과 반응하여 황산암모늄이 된다. 이 플라스크를 증류장치에 연결하고 플라스크에 장착한 적하(滴下)깔때기 속으로 수산화나트륨용액을 떨어뜨려 플라스크 안의 용액을 충분히 알칼리성이 되게 하여 황산암모늄을 분해하고 수증기를 통해 암모니아를 완전히 증류한다. 이 암모니아를 일정량의 산에 흡수시켜 포착하고, 유출이 완전히 끝나면 산의 과잉량을 알칼리로 역적정(逆滴正)하여 유출한 암모니아의 양에서 이에 대응하는 시료 가운데 질소량을 구한다.
2. Biuret reaction

Biuret 반응은 단백질이나 펩타이드의 발색반응의 하나로 시료(試料)의 수용액에 수산화나트륨 NaOH의 수용액을 소량 가하여 알칼리성으로 하고 여기에 황산구리 CuSO4·5H2O를 5%로 한 수용액을 가하면 청자색~적자색을 띤다. 단백질이나 펩티드만이 아니고 뷰렛 H2NCONHCONH2도 색이 나타나므로 이렇게 부른다.

참고 자료

없음