고형 영양 배지의 제조 및 균 접종

소개글

고체 배지에서 3가지 세균 bacillus , staphylococcus aureus , E.coli 를 배양하는 실험 레포트 입니다 8장 분량인만큼 내용과 결과 면에서 이정도면 완벽하다 생각합니다

목차

1. 실험 제목
2. 실험 날짜
3. 실험 재료
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 실험토의(고찰)

본문내용

1) Agar 2.0g과 Nutrient Broth 0.8g을 약수저와 전자 저울, 기름 종이를 이용하여 정확한 양을 분리한 뒤, 삼각플라스크(250ml)에 넣는다.
※ 여기서 Agar는 배지를 고체배지로 만드는 역할을 하는데, Agar는 배지에서 1.5~2.0%로 만들어야 한다. Agar의 양이 많으면 배지가 너무 딱딱하면 굳어 균이 영양분을 흡수하 지 못하기 때문이다.
2) 메스실린더(100ml)를 이용하여 증류수 100ml을 삼각플라스크(250ml)에 넣은 뒤, 호일 을 삼각플라스크 입구를 씌운다.
※ 호일은 플라스크 안에 공기 중의 균이 들어가는 것을 막아준다.
3) 혼합된 삼각플라스크를 indicator tape를 붙인 뒤 Autoclave를 121℃, 15ℓb/inch2, 30min를 실시한다.

※ indicator tape는 평상시 일반 종이이지만, Autoclave를 실시하면 대각선으로 검은 줄이 생긴다.
※ Autoclave를 실시한 뒤 밸브를 이용하여 압력을 낮춘뒤, 80℃이하가 되었을 때 연다.
4) Clean bench를 소독한 뒤 petri-dish와 Autoclave한 삼각플라스크, 알코올램프, 백금이 를 알코올 70%로 소독하여 넣는다.


5) petri-dish를 반만 열어 놓은 상태에서 삼각플라스크 안에 있는 혼합된 액체를 20ml씩 5개에 각각 넣은 뒤, 굳을 때까지(약 20분 소요) 기다린다.
6) petri-dish 3개는 각각 백금이를 이용하여 기존에 배양했던 E.coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis 를 1개씩 접종한다.
7) 균 접종시 백금이를 알코올 램프로 화염멸균 시킨 뒤 자연냉각 시킨 뒤 기존 균을 채취 하여 배지에 streaking을 한 후, 다시 화염멸균 시킨다. 자연냉각 시킨 후 멸균된 백금 이를 균을 채취하지 않은 상태에서 2차 streaking을 1차 streaking 한 세균이 묻도록 하여 90도 엇갈려서 실시한다.

참고 자료

최호형, 2004, 미생물학, 1st, 아카데미서적, 서울, P 143～146
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