Ⅰ.Auxotrogh mutant colony selection

소개글

Ⅰ.Auxotrogh mutant colony selection
(Direct selection)

* Object : 원하는 유전자를 가진 clone만 직접적으로 selection하기 위한 plating과정.

목차

* Object :

* Theory 보충

* Procedure

* Result

* Discussion

* Reference

본문내용

* Procedure

1. 잘 배양된 wild type의 균과 mutant균을 pippet으로 LA, LB배지 위에 찍는다.
2. 하루 동안 incubation후 관찰한다.

tip. 1 모든 과정은 알코올램프 옆에서 한다.
이유 : 무균적으로 시행해야 하는 실험인 만큼 타 균의 침입을 막기 위함이 다. 알코올램프의 근처는 상승기류 가 발생하기 때문에 위에서 떨어지 는 균들은 상승 기류를 타고 올라 가게 되므로 타 균의 침입을 어느 정도 방지할 수 있다.

tip. 2 70% EtOH로 손과 테이블을 살균한 뒤 실험에 임한다.
왜 70%일까? - 에탄올은 비교적 살균력이 낮은 항미생물약이나 적합한 농도에서는 중등 도의 효능을 나타낸다. 일반적으로 모든 병원균에 대해 살균작용을 나타내 나 예외적으로 에탄올로서 살균효과를 볼 수 없는 몇 종의 세균들이 있으 며 진균 및 바이러스 또한 에탄올로 살균효과를 기대할 수 없다. 에탄올의 작용기전은 세포단백을 침전시키고 세포막의 지질을 용해시키는 효과를 가 지고 있으며, 포도상구균에 대해서는 40～60% 농도에서 가장 유효하다. 피부에서 70% 에탄올은 적용부위에 습기가 있는 한 피부세균의 90%를 거의 2분내에 사멸시키지만 80% 이상의 농도에서는 오히려 효능이 떨어 진다. 창상이나 개방 표면에 도포시, 조직 손상을 증가시킬 뿐 아니라 응 괴(coagulation)를 형성하여 그 하부조직에서 세균이 성장할 수 있어 개방 창상에는 사용하지 말아야 한다.

참고 자료

없음