[생명공학]transformation

소개글

E- coli를 이용한 transformation

목차

Introduction
1. Transformation의 원리
2. Transformation의 확인
Materials and Method
Result
Reference

본문내용

Introduction

공여 DNA 분자가 세포막을 지나 수용체 박테리아의 세포질 안으로 들어가는 운동은 에너지를 요구하는 능동적인 과정이다. 이 과정은 투과성 세포벽이나 막을 통한 DNA 분자의 수동적인 확산을 포함하지 않는다. 형질전환은 모든 종의 박테리아에서 자연적으로 일어나는 과정이 아니다. 오히려 이 과정은 배지에 자유롭게 떠다니는 DNA 분자들과 결합하여 세포질 속으로 운반할 수 있는 단백질과 효소적 기구를 소유한 일부 종에서만 일어날 수 있다. 형질전환에 요구되는 8에서 10가지의 새로운 단백질의 합성을 유도하는 작은 단백질인 수용능요소(competence factor)를 분비하는 능력세포(competent cell)만이 오직 형질전환의 수용체로서 능력을 가진다. Competent cell은 커다란 이중나선형의 DNA조각을 박테리아 표면에 있는 특정 수용부위에 부착하고 있다. 한정된 수의 수용체들이 존재하기 때문에 DNA분자들은 서로 이 자리의 결합을 위해 경쟁한다. 결합에 이어, DNA는 막을 가로질러 안으로 이동한다. 이 이동은 에너지를 필요로 하는 능동적 과정이다. DNA 가닥 중의 하나는 막-부착 엑소뉴클리아제에 의해 가수 분해되어, 나머지 DNA 가닥이 막을 통과하는 데 필요한 에너지를 공급한다. 분해되지 않은 DNA 가닥은 수용능 요소에 의해 유도된 막 단백질과 결합하여 막을 통과해서 세포질로 운반된다. 이 단일가닥의 DNA 조각은 DNA-결합 단백질로 둘러싸여지고, 재조합 단백질은 수용체 세포의 염색체 중 상동 지역을 찾아낸다. 다른 재조합 효소들은 공여 DNA의 단일가닥의 삽입을 촉매하여, 수용체 세포의 염색체에서 상동 지역과 교체시킨다. 이 유형의 재조합은 단지 수용체의 세포만이 유전적으로 개조되기 때문에, 한 방향성이며 비상호적이다.

참고 자료

1. 기능성 생명공학 실험 수업 중 나눠준 Protocol
2. 기능성 생명공학 실험, 경북대학교 누리사업단 편찬
3. 기능성 생명공학, 경북대학교 누리사업단 편찬
4. 최신 유전학, 김상구 · 서동상 · 서봉보 · 이정주 · 정기화(공역)