[생화학]RNA Extrantion

소개글

Rna Extraction Report

쥐의 spleen에서 RNA를 추출하는 실험의 결과보고서.

목차

1.제목
2.목적
3.서론
4.실험준비물 & 실험방법
5.실험결과
6.토의

본문내용

1.제목 : Extract RNA
2.목적 : Spleen에서 RNA를 추출한다.
3.서론 :
RNA :
리보핵산(ribonucleic acid)이라고도 한다. 핵산의 단위물질인 뉴클레오티드(nucleotide)가 매우 길게 연결된 고분자 유기물인데, 이 뉴클레오티드는 염기와 탄수화물의 일종인 펜토오스(오탄당), 그리고 인산이 각각 1분자씩 결합한 물질이다. 이 구성성분에서 펜토오스의 당이 리보오스(ribose)일 때 RNA라 하고, 디옥시리보오스(deoxyribose)이면 DNA(deoxyribonucleic acid)라 한다. RNA를 구성하는 뉴클레오티드의 4가지 염기는 아데닌(adenine:A)·구아닌(guanine:G)·시토신(cytosine:C)·우라실(uracil:U)이다. 따라서 RNA의 뉴클레오티드에도 A, G, C 또는 U를 가진 네 가지가 있게 된다. 이 뉴클레오티드의 연결방식은 다음과 같다.

a. spleen 100mg에 TRI zol 700㎕를 섞는다.
b. homogenize
c. 실온에서 5분간 둔다.
d. 0.3ml의 cloroform을 넣고 격렬하게 섞는다.
e. 실온에서 2~3분간 둔다.
f. 12,000 rpm으로 4℃에서 15분간 원심분리한다.
g. 가장 위층에 있는 aqueous phase를 새 튜브로 옮겨 담는다.
h. 0.6ml Isopropanol(isoprophyl alchol)을 넣고 격렬하게 섞는 후, 실온에서 20분간 둔다.
I. 12,000rpm, 4℃, 10분간 원심분리한다.
j. 상층액(supernatant)을 제거한다.
k. 1ml 70% 또는 75% ethanol을 넣은 후, 섞는다.
l. 12,000rpm, 4℃, 5분간 원심분리한다.
J. 상층액(supernatant)을 완벽하게 제거한다.
K. 침전물(precipitation)에 DEPC water를 넣는다.

참고 자료

Lehninger -Principle of Biochemistry-