[자연과학]PCR 과 DNA replication

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PCR 과 DNA replication
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목차

〈요약〉
〈본문〉

본문내용

〈요약〉
1) PCR
- 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하다.
PCR은 DNA분자의 특정 부위를 선택적으로 증폭시킨다. 어떤 DNA분자의 어떤 부위라도 선택될 수 있다. Border sequence들은 PCR이 수행되기 위해서 알려져 있어야 한다. 또한 두 개의 짧은 oligonucleotide가 이중나선의 각 가닥과 혼성화되어야만 한다. DNA합성반응을 위한 primer로써 역할을 하는 이들 oligonucleotide들은 증폭될 부위의 범위를 정해준다.
◎ PCR 과정
1) Pre-PCR status : PCR 전 실온의 buffer condition에서의 DNA는 안정적인 B form double helix구조를 이루고 있다. templates라고 부르기도 한다.
2) Denaturation : 공유 결합으로 이루어져 있다. PCR에서 base pairs간의 hydrogen bond를 끊기 위해 사용하는 energy는 보통 90oC까지 열을 가하 면 single strnad로 풀어진다.
3) Annealing : PCR의 최종적인 sensitivity와 specificity를 결정하는 제일 중요 한 과정.
4) Extension : Taq polymerase가 primer의 3’end의 free OH기를 시작점으로 해서 single strand template의 상보적인 dNTP를 가져와서 붙여 나가며 chain extension을 시행한다.
2) DNA replication
- DNA 분자는 상보적인 염기쌍에 의한 이중나선으로 된 독특한 구조를 가지고 있다. 복제되는 동안에 DNA 분자의 이중나선은 풀려지고 상보적인 염기쌍은 서로 분리된다. DNA 복제는 먼저 단사 DNA를 주형으로 하여 작은 RNA 단편을 합성하여야 시작된다. 약 5개 nucleotide 길이의 작은 RNA primer가 먼저 합성되고, 이 primer의 3`-말단에 deoxyribonucleotide가 첨가되면 5`→

참고 자료

이정근, 오석준, 김종민 역, 바이오인포매틱스, 한빛 미디어, 2001
Snyder and Champness, "Molecular genetics of Bacteria" 1997
DNA Microarray와 최신 PCR 기법 수윤사 (2000)
http://www.immunoblot.com
http://www.komabiotech.com
http://www.bmskorea.co.kr
http://www.chinju.ac.kr/~hak31/down/DNA Replication.hwp
http://kimwootae.com.ne.kr/mb/dnareplication.htm
http://www.dongeui.ac.kr/%7Ecblee/lec05/bio05.html
http://www.knou.ac.kr/~bhkim/study52.htm