[생물학실험][서울대]형질전환

소개글

서울대 교양 생물학실험 강좌를 수강하며 작성한 레폿입니다.
레폿 성적으로 A+받았습니다.
참고하시고 도움되시길 바랍니다.
번거롭지 않게 한꺼번에 다운받고자 하는 학우들을 위해
한 학기 동안 작성한 10개의 레폿을 압축하여 올려놓기도 하였으니 참고하시길 바랍니다.
(Discussion이 3장 정도 됩니다.)

목차

1. Introduction
2. Materials and Methods
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

1. Materials and Methods

(1)Materials
Echerichia coli, plasmid DNA, LA agar plate, LB Broth, 마이크로 피펫, 소형 원심분리기, water bath, 회전식 교반기, E-tube, Ice, Spreader

(2)Methods
1. competent cell을 얼음에 꽂아두고 완전히 녹인다.
2. 한 tube에는 competent cell 20㎕에 vector DNA 2㎕를 가하여 섞고, 나머지 한 tube에는 DNA를 넣지 않는다. DNA를 넣어준 뒤 가볍게 tapping하여 넣어 준 DNA와 competent cell이 잘 섞이도록 한다.
3. 이 혼합물을 42℃ water bath 에서 90초간 놓아둔다. 그 다음 얼음에 옮겨 1~2분간 놓아둔다.
4. LB 배지 800㎕를 각 튜브에 넣어 37℃ water bath에서 약 45분간 배양한다.
5. Ampicilin이 포함된 LB인 LA agar plate에 100㎕를 떨어뜨린 후 spreader로 골고루 펴서 말린다.
6. plate를 뒤집어서 37℃에서 배양한다. 12~16시간 후에 콜로니 형성 여부를 관찰한다.

*주요 실험 재료 및 용어 정리

1. Competent cell
- E.coli를 포함한 대부분의 박테리아는 일반적인 환경에서 극히 제한된 양의 DNA만을 받
아 들인다. 이러한 종류를 효과적으로 transformation 시키기 위하여 박테리아는 DNA를 받아들이는 능력을 향상시키는 물리적, 화학적 형태의 처리가 필요하다. 정상적인 박테리아 cell에 이러한 물리적, 화학적 처리를 하여 외부의 DNA가 잘 들어갈 수 있도록 만든 cell을
competent cell이라고 한다.

참고 자료

김영민 외, 생물학실험, 아카데미서적, 1993.
민철기, 일반생물학실험서, 라이프사이언스, 1998.
Purves et al., Life the science of biology-sixth edition, 교보문고, 2005.
www.google.com
http://blog.naver.com/mima99