[생물]E.coli culture

목차

1. Title
2. Date
3. Purpose
4. Materials
5. Method
6. Result
7. Discussion

본문내용

1. Title : E.coli culture

2. Date : 2006.3.13

3. Purpose : E.coli 배양하기 위해서는 미생물의 영양분을 공급하는 배지(media)가
필요하므로 배지의 제조방법을 습득 & 배양해본다.


4. Materials : H2O , tryptone, yeast extract, NaCl,
antibiotic (spectinomycin), micro agar, single bacterial

5. Method
* LB Medium (액체-1L)
① 증류수 850 ml을 삼각플라스크에 add
② tryptone 10g, yeast extract 5g, NaCl 10g ①에 add
③ 나머지 volume을 메스실린더로 H2O를 넣어 삼각플라스크에 채운다. (1L)
④ pH를 측정 (PH-7) - 적당하지 않을 경우 HCl과 NaOH로 조절해준다.
⑤ label
⑥ Autoclaving 20분 동안
⑦ antibiotic (spectinomycin) add

* LB Medium (고체-500ML)
① 증류수 300 ml을 삼각플라스크에 add
② tryptone 5g, yeast extract 2.5g, NaCl g ①에 add
③ 나머지 volume을 메스실린더로 H2O 를 넣어 삼각플라스크에 채운다. (500ML)
④ pH를 측정 (PH-7) - 적당하지 않을 경우 HCl과 NaOH로 조절해준다.
⑤ 1% micro agar add
⑥ label
⑦ Autoclaving 20분 동안

* LB Medium (고체-500ML) Growth
① 플라스크의 LB Medium를 적당한 온도로 식힌다.
② plate에 나누어 부은 다음 굳기를 기다린다.
③ antibiotic (spectinomycin) add
④ single bacterial 을 4ml LB 배지에 옮긴다. (살짝 긁어준다 지그재그)
⑤ 37℃ incubate에 24시간동안 키운다.
⑥ colony 확인

참고 자료

없음