[생명공학실험]SDS-PAGE에 의한 단백질 전기영동

소개글

직접 작성한 레포트 입니다
점수도 잘 받았구요 ^^

목차

1. 실험날짜
2. 실험제목
3. 실험목적
4. 실험원리
(1) 단백질 전기영동
(2) SDS (Sodium Dodecyl Sulfate)
(3) SDS-PAGE (SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
(4) Polyacrylamide Gel
(5) 단백질 spot의 검출
(6) 단백질 해석법
5. 참고문헌

본문내용

2. 실험제목
: SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)에 의한 단백질 전기 영동

3. 실험목적
: SDS-PAGE를 이용한 단백질 전기영동으로 단백질을 분리하고 미지 분자량을 측정해본다.

4. 실험원리

(1) 단백질 전기영동
단백질은 아미노산이 길게 연결되어 있는 고분자 물질이다. 각각의 아미노산의 종류와 배열 순서에 따라 그 기능이 정해진다. 단백질은 선형의 일차 구조에서 다른 여러 수소결합, 소수성 결합 등에 의 해서 입체적인 구조를 가지게 된다.

단백질 전기영동(electrophoresis)은 단백질분자의 전하를 이용한 분리, 분석법이다. 단백질 분자는 보통 등전점 이외의 pH에서는 양 또는 음의 전하를 가지고 있어서 일정한 pH의 완충액 중에서 직류 전류를 가하면 양극 또는 음극방향으로 이동한다. 전기영동의 원리는 단백질의 길이에 의존한다. 단백 질의 3차 구조를 깨고 선형으로 만들어서 단백질의 charge에 의해 한쪽 전극 방향으로 끌리게 만든 다. 즉 단백질 분자의 전하량, 분자의 크기에 따라 이동하는 속도가 다른 점을 이용하여 분리, 분석하 는 것이다. 단백질을 여과지, 전분이나 agarose와 같은 다당류 gel, polyacrylamide gel 등과 같은 것을 담체로 하여 전기영동 하면 단백질은 band를 형성하여 분리되므로 분리, 분석조작이 간단하게 된다. 또한 모든 단백질들은 구성하고 있는 amino acid에 따라 질량과 pI (isoelectric point)값이 다 르다. 따라서 이 두 요인을 이용하여 단백질을 분리할 수 있다. pI를 이용하여 단백질을 펼치는 방법 을 IEF (isoelectric focusing)라고 하며 질량에 의해서 단백질을 펼치는 방법을 SDS-PAGE (SDS-polyacrylamide gel electrophoresis) 라고 한다.

참고 자료

없음