[임상검사]알카라인포스페테이스 검사

소개글

각종 골질환의 이상, 간기능 및 담도계 질환, 그 밖에 악성종양(폐암), 갑상선 기능,
Rickets 등의 치료효과를 관찰 하기위해

목차

● Purpose

● Principle

● Material & Apparatus

● Procedure

● Result

● Reference

본문내용

● Purpose
◦ 각종 골질환의 이상, 간기능 및 담도계 질환, 그 밖에 악성종양(폐암), 갑상선 기능,
Rickets 등의 치료효과를 관찰 하기위해 alkaline phosphatase를 측정한다.


● Principle
◦ 무색의 paranitrophenylphosphate(PNPP)를 기질로 하여 반응시키면 효소(phosphatase)는
그 중 phosphate group을 분해하여 free의 paranitrophenol(PNP)이 형성되고 이것은
알칼리 조건에서 nitrophenolate ion으로 되어 매우 짙은 황색을 가지는 quinoid 구조를
나타낸다. 그 반응 pH에서는 대부분의 free nitrophenol은 황색의 quinoid form으로
존재하므로 그 반응의 과정은 황색의 색도 증가를 관찰 할 수 있으며, 반응의 시간을
정확히 30분간 진행시키고, sodium hydroxide를 가하여 효소를 불활성화시키고
곧 nitrophenolate의 색을 희석하여 410nm에서 흡수도를 측정한다.
반응에서 형성된 nitrophenol의 양은 표준곡선에서 계산된다.


● Material & Apparatus
◦ Test tube, Rack, Holder, Parafilm, Pi pump, Serological pipet, Micro pipet,
Serum, D.W., Buffer sol., 0.02N NaOH, 12N HCl, Spectrophotometer(spectronic 20+)


● Procedure
① 우선 세개의 시험관을 준비하고 각각 “ T, B1, B2 ”라고 표시한다.
② 여기에 각각 완충기질 1㎖를 넣고 37℃로 5분간 가온한다.
③ 다음과 같이 각각 첨가 후 37℃ 항온조에 30분간 방치한다.

참고 자료

없음