[생화학실습] ELISA

소개글

ELISA실험 이론과 과정, 결과, 고찰이 포함되어 있어 실제 실험시 유용한 자료가 될 것입니다

목차

1.Subject

2.Introduction
(1)ELISA
(2)Direct ELISA & Indirect ELISA
(3)Western blotting
(4)항원항체반응

3.Materials$Method

4.Result

5.Discussion

본문내용

*Discussion
이번 실험은 indrect ELISA로 항원를 검출하고, 항체의 농도에 따른 optical density를 비교하는 실험이었다. 특별히 까다로운 실험과정은 없었으나 실제 실험결과와 예상했던 결과가 달랐다.
일단 4개 well 모두 2차 항체가 TNB에 발색되었다. 2차 항체는 항원에 결합한 1차 항체에 결합했으므로, 발색을 통해 항원의 존재를 확인할 수 있었다. 결국 Optical density는 1차 항체의 농도와 동일하므로, 1차 항체를 TBS Buffer로 희석 비율에 맞게 희석했을 때 항체의 농도가 가장 높은 1번이 가장 진한 색을, 그 다음부턴 차츰 연한 색을 띄어야 한다. 그러나 결과는 그 반대였다. 미세하지만 2, 1, 3, 4번 순서로 진해져 4번이 가장 진한 색을 나타냈다. 오차원인으로는 항원 분주 시 균일하게 분주되지 않았거나, 항체 분주 시 혹은 TBST 분주 시 균일한 분주가 안됐을 수 도 있다. 또, 희석을 할 때 비율을 잘못 계산하였을 수 도 있&#<font color=aaaaff>..</font>

참고 자료

․Garrett & Grisham(1997) Biochemistry 1st, p.405, 407, Sauders College Publishing, Virginia
․http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/E/Elisa.html
․http://k.daum.net/qna/kin/home/qdetail_view.html?boardid=M&qid=0A65q
․http://www.biology.arizona.edu/immunology/activities/western_blot/w_main.html