[화학] 단백질 농도 결정

소개글

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목차

1. 제목
2목적
3재료 및 방법
4.결과
5.discussion
6.참고문헌

본문내용

1. 제목 : Protein Concentration Determination
- using Bicinchoninic acid(BCA) assay

2목적: 생화학 실습의 기본인 단백질 농도 결정의 방법을 이해한다.

3재료 및 방법:
-재료: 분광 광도계
항온기
셀
피펫
테스트 튜브
-방법:1. standard 용액을 만든다. BSA 10mg에 100ml 의 증류수를 혼합한다. (1㎎/㎖).
2. BSA 0, 10, 20, 30, 40(μg)을 50μl 씩 만든다.
3. Reagent A와 Reagent B을 혼합한 Standard Working Reagent (SWR) 900μl를 각 시험관에 넣은 후 37℃에서 30분동안 incubation 한다.
4. 색 변화를 관찰한다.
5. 농도가 작은것부터 차례로 562nm에서 흡광도를 잰다.
6. Unknown sample의 흡광도를 잰다.
7. 위 실험결과를 토대로 Linear regression을 재고 R2값을 구한다.
8. 방정식을 이용하여 Unknown sample의 농도를 계산한다

참고 자료

-한국 생화학회(1999), 실험생화학 개정 3판, pp.171~184,197~206, 탐구당, 서울
-http://web.hanyang.ac.kr/%7Ebiopro/Course%20Materials/analyze/1-protein%20assay.
hwp
-http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?d1id=11&dir_id=110204&docid=146128
-http://www.mecasys.co.kr/downloads/Quantitative_06.htm#