[유전학 실험] DNA purifications

목차

1. Introductions
2. Materials
3. Methods
4. Results & Discussions
5. References

본문내용

1. Introductions

이번 실험을 통하여 박테리아에서 plasmid DNA를 뽑아낼 수 있고 gel electrophoresis를 통해 DNA를 분리하는 방법을 배운다. 또한 DNA추출과 전기영동에 이용된 시약의 특성을 이해하고 클로닝에 이용되는 plasmid의 특성 및 제한효소의 기능을 이해한다. 유전자에 대한 특성을 위해서는 1차적으로 클로닝 과정을 통해 특정 유전자를 확보하는 것이다. 유전자를 클로닝하기 위해서는 유전자를 운반할 vector 및 vector의 증폭에 이용될 숙주세포가 필요하다. vector에는 여러 종류가 있지만 매우 흔하게 이용하는 것이 plasmid이다. 플라스미드에 restriction enzyme과 DNA ligase를 이용하여 외부 DNA를 삽입한 후 숙주세포에 형질 전환시켜 증폭하면 외부 DNA를 짧은 시간 내에 매우 많은 양을 얻을 수 있다.
제한효소는 세균바이러스의 증식을 막아주는 효소로 침입한 바이러스의 DNA를 절단하는 효소로 발견되어 바이러스의 증식을 제한 (restriction)한다하여 이름 붙여졌다. 숙주 세포의 핵산분해효소 (제한효소)가 바이러스의 특정한 염기배열을 인식하여 그 부위를 절단하여 바이러스의 게놈을 파괴한다. 제한효소는 특정한 염기배열을 인식하여 그 염기배열만을 절단하며 대략 4-8개의 염기배열을 인식하여 절단하는 제한효소가 일반적인 실험에서 유용하게 쓰인다. 제한 효소는 자신이 인식하는 염기배열을 절단할 때 그림과 같이 돌출된 부분은 만들 수 있으며, 이들 돌출된 부분은 서로 상보적이기 때문에 다시 서로 수소결합을 통하여 결합하게 되며, 유전자 분리 및 재조합 DNA를 만드는데 이용되고 있다.
본 실험에서는 박테리아를 배양하여 세균 내에 있는 플라스미드를 추출해 보고, 이를 제한효소로 잘라 전기영동 하여 분리해 보고자 한다.

참고 자료

http://kbiotec.kijeon.ac.kr/pro_master/Lee_sun_hee/lee2_2_01.asp
http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?d1id=11&dir_id=110205&docid=1238462&ts
=1104227857
Principles of Genetics 7th / Robert H. Tamarin / 2002 / Mc Graw Hill