[생명공학실험2] Plasmid purification

목차

1. 실험목적

2. 실험원리
1) Plasmid
2) Plasmid의 분류
3) Plasmid의 능력
4) 플라스미드의 특징
5) 플라스미드의 분리 및 정제

3. 실험방법

4. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
생명공학의 기초가 되는 분자생물학의 기본 기술에 대하여 다룬다. 미생물에서 plasmid DNA를 분 리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전환체 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득 한다.

2. 실험원리
1) Plasmid
많은 세균은 염색체 이외에 plasmid라고 불리우는 크기가 작은 환상 DNA분자를 여러 개 가지고 있 다. 이 plasmid는 형태는 원형이고, 이중 나선으로 되어 있으며, 크기가 염색체의 0.1~0.5%이고, 염색체 복제와는 다소 독립적으로 복제되어 한 세 대에서 다음세대로 전달된다. Plasmid DNA는 유전자를 포함하고 있고, 대 부분 plasmid 복제에 관련되어 있다.
plasmid는 우선 자가 복제를 위한 복제 기점(origin of replication)을 가지고 있고, 유전자의 발현, 즉 삽입된 유전자의 전사를 유도하는 promoter, 나중에 세포 배양에 의한 대량 생산 후에 플라스미드가 들어간 세포와 그렇지 않은 세포를 구별해 내기위한 selective marker, 그리고 숙주 안에서 copy number를 조절하는 replicon, 그리고 원하는 유전자를 끼워 넣을 수 있는 insertion site 등을 가지고 있다.

참고 자료

- 분자생물학, 한국분자생물학회, 아카데미서적, 1997
- 최신미생물학실험, 홍순우외 12명, 아카데미서적, 1987
- Recombinant DNA ( Watson외 3명, Freeman Publishing)
- http://www.kjcp.co.kr/note/lecture%20note/mole/molecular%20note/mole-3.htm,
- Bio View(1993) 8, 15
- 생물 공정 공학, Michel L. Shuler, 2003, 교보문고
- 발효미생물학, 이계준, 2002, 라이프 사이언스
- http://vlib.org/Science/Cell_Biology/index.shtml, The WWW Virtual Library of Cell Biology