[분자유전학] 진핵유전자를 E. coli에서 발현시킬때 문제점과 eukaryotic gene의 대량생산 방법

목차

1. 외래 유전자의 염기서열로 인한 문제들
1) intron을 가진 경우
2) 외래(진핵)gene의 서열이 E.coli의 terminator와 일치 시
3) codon bias

2. 외래 유전자의 염기서열로 인한 문제점의 해결방법 (효율적인 발현을 위한 3가지 방법)

3. 대장균에 의해 일어나는 문제점과 해결방법
< eukaryotic gene의 대량생산 방법>
1. Production of Recombinant protein by eukaryotic cells
2. 효모와 사상균류(filamentous Fungi)에서의 재조합 단백질
3. 재조합 단백질을 생성하기 위한 동물세포의 이용
4. 식물체로부터의 재조합 단백질 생산

본문내용

3) codon bias
:amino acid를 암호화하고 있는 codon은 64개이고, 그중 3개가 translation을 멈추게 하는 stop codon으로 작용한다. 61 sense codon는 codon redundancy의 문제를 가지고 있다. codon bias란 하나의 amino acid를 지정하는 여러 개의 codon중 특정 codon만을 많이 사용하여 amino acid를 생산하는 것이다. 균주마다 자기가 좋아하는 codon이 존재한다. 즉, 특정 tRNA의 양의 차이가 나타난다. 따라서 발현이 많이 되는 codon을 가지면 유리하므로 site specific mutagenesis를 이용한다.
Figure 2. Typical promoter sequences for E. coli and animal genes
또한, 서열이 짧은 경우 아예 새로운 DNA를 chemical synthesis(2kb 이내)이용하여 translation에 유리한 codon이 존재하도록 합성한다.

참고 자료

1.http://bh.knu.ac.kr/%7Eygpark/Students/LecNote/Culture/jjb15.htm
2.http://www.nonoil.com/bio/engineering/chapt12.htm#12.2.%20General%20Problems%20With%20the%20Production%20of%20R
3.http://home.kyungwon.ac.kr/gene/%B0%AD%C0%C7%B3%EB%C6%AE/%C0%AF%C0%FC%B0%F8%C7%D0/gene13.doc