[생물,화학,유전] 단백질전기영동(크로마토그래피)

소개글

젤 전기영동과 여러가지 크로마토그래피에 대해서 조사해 놓았습니다. 전기영동의 실험적 순서(protocol)을 참고로 첨부해 놓았습니다. 많은 도움 되세요.

목차

* 단백질 분리와 전기영동
* 단백질의 분리와 정제에 이용되는 크로마토그래피.
* 2D-electrophoresis
1) SDS-PAGE
2) IEF

* Peptide mass fingerprints : MALDI-TOF MS
1) Trypsin digested peptides
2) MALDI-TOF MS의 원리

* 전기영동의 원리
* 전기영동법의 종류
1) CELLULOSE ACETATE지 전기영동
2) 한천젤 전기영동
3) 녹말젤 전기영동
4) 폴리아크릴 아마이드젤 전기영동
5) SDS 폴리아크릴 아마이드젤 전기영동
6) ISOELECTRIC FOCUSING

-실 험-
A. 배양세포로부터 단백질의 분리
B. 단백질의 정량
C. 단백질의 전기영동(SDS-PAGE)

본문내용

* 단백질 분리와 전기영동

단백질을 분리하는 방법은 분리하고자 하는 단백질이 무엇인가에 따라서 매우 다양하다. 단백질이 핵에 존재하는지 세포질에 존재하는지에 따라서, 또 단백질의 성질에 따라서 적당한 방법을 선택하여 써야 한다. 가장 처음에는 조직이나 세포로부터 핵단백질이나 세포질단백질 또는 전체단백질을 분리하는 것으로 시작하며, 이로부터 수많은 정제과정을 거쳐야 원하는 단백질을 분리할 수 있다. 이 과정은 대단히 노력, 끈기, 자본을 요하는 것으로써 평생동안 한가지 단백질을 정제하는 과학자도 있음을 생각해야 한다. 여기에서는 정제되지 않은 전체단백질(whole cellular protein)을 분리하는 방법만을 소개하기로 한다. 물론 여기에도 수많은 방법이 있을 수 있다. 그 전에 단백질의 분리 이전의 3차구조 풀림과 단백질의 크기를 측정하는 법을 알아보도록 한다.


* 단백질의 분리와 정제에 이용되는 크로마토그래피.

단백질은 크로마토그래피(chromatography)에 의해 분리 정제될 수 있다.
일반적으로 단백질의 원료는 조직이나 미생물이다. 어떤 단백질이든 정제과정의 첫 번째 단께는 이러한 세포들은 깨트려서 그들의 단백질을 유리시켜 조추출액(crude extract)이라 부르는 용액상태로 만드는 일이다. 필요하면 세포하 분획을 준비하거나 특정 소기관을 분별하기 위해 분별 원심분리법(Differential centrifugation)응 사용할 수도 있다.

참고 자료

본문에 소개되어 있음.