충북대 일반생물학실험_9_PCR 결과 확인(전기영동)
- 최초 등록일
- 2024.07.18
- 최종 저작일
- 2016.05
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소개글
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목차
Ⅰ. 실험 목적(Purpose of experiment)
Ⅱ. 배경지식(Background knowledge)
Ⅲ. 가설 설정(Setting up hypothesis)
Ⅳ. 실험(Experiment)
Ⅴ. 결과(Results)
VII. 인용문헌(Literature cited)
본문내용
Ⅰ. 실험 목적(Purpose of experiment)
지난 11주차에 추출한 DNA의 PCR결과를 전기영동을 통해 확인한다.
Ⅱ. 배경지식(Background knowledge)
1. PCR(Polymerase chain reaction)
PCR(polymerase chain reaction)법은 DNA 또는 RNA의 특정영역을 시험관 내에 대량으로 증폭하는 획기적인 기술이다. 그 원리는 극히 단순하고, 쉽게 응용할 수 있기 때문에 순수 분자생물학 분야 이외에도 의학, 이학, 농학, 수의학, 식품과학, 환경과학 뿐만 아니라 고고학이나 인류학에 이르는 분야까지 그 활용범위를 넓혀가고 있다. PCR증폭효율에 영향을 미치는 요인으로는 ① 각 단계의 반응온도와 시간, ② cycle수, ③ 반응액 조성(주형 DNA, dNTP농도, Mg2+농도 등), ④ primer 설계, ⑤ 사용 DNA polymerase 등이 있다. 또한 몇 가지 반응첨가물(DMSO, 비이온계면활성제, 글리세롤) 등에 따라 반응촉진효과가 나타나는 경우가 있다.
PCR(Polymerase chain reaction)은 1980년대 중반에 Kary Mullis에 의해 개발된 것으로 특정염기서열을 증폭함으로써 DNA 염기서열 분석 및 현대 분자생물학의 발전을 가져왔다. PCR 방법에 가장 흔히 사용되는 DNA 중합효소(DNA polymerase)는 Taq 1 polymerase이다. 초기에는 E. coli polymerase를 사용하였으나 열에 불안정하여 각 cycle이 진행 될 때 마다 효소를 첨가해주어야 하는 불편함이 있었다. 그래서 개발된 것이 75℃ 온천에서 분리한 세균 Thermus aquaticus에서 얻은 DNA polymerase이다. Taq 1 polymerase는 72℃에서 최적으로 DNA를 합성하고 94℃에서도 안정성을 갖기 때문에 각 cycle마다 효소를 첨가할 필요 없이 특정 염기서열을 증폭할 수 있다.
참고 자료
Polymerase Chain Reaction과 반응산물의 정제
http://amborella.net/2010Bioinformatics/Week01-workshop.pdf
Product News Letter 3호 ‘Polymerase Chain Reaction’
http://www.elpisbio.com/data/News%20letter/News%20letter%203.pdf