식물분자생물학실험 Histochemical GUS assay 결과보고서

목차

1. 실험제목
2. 실험일자
3. 실험개요
4. 실험이론
5. Materials and methods
6. 실험결과
7. Discussion
8. References

본문내용

Escherichia coli β-glucuronidase gene uidA (GUS)를 식물에서 reporter gene으로 활용하는 연구방식은 1987년 Jefferson 등에 의해 도입되었으며(1) 현재도 높은 감도, 효소 안정성 및 형광 측정, 분광 광도 측정 또는 조직화학적 기술을 통한 검출의 단순성으로 인해 자 주 활용되고 있다. 특히 GUS는 histochemical staining을 통해 endogenous promoter activity를 관찰하는데 있어서 매우 유용하다.(2)
이를 진행하는 과정을 살펴보면, transgenic uidA gene을 가진 식물을 5-bromo-4-chloro- 3-indolyl ß-d-glucuronide (X-Gluc)로 처리한다. X-Gluc는 GUS에 의해 산화적으로 이량체 화되며, GUS 염색의 특징적 청색 색소인 5,5′-dibromo-4,4′-dichloro-indigo를 생성하는 두 개의 indoxyl derivative로 분해된다.

참고 자료

Jefferson RA, Kavanagh TA, Bevan MW. GUS fusions: beta-glucuronidase as a sensitive and versatile gene fusion marker in higher plants. EMBO J. 1987;6(13):3901-7.
Dedow LK, Oren E, Braybrook SA. Fake news blues: A GUS staining protocol to reduce false- negative data. Plant Direct. 2022;6(2):e367.