세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 09. TUNEL staining

소개글

세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 09. TUNEL staining 관련 레포트 입니다.

목차

１.   서론
 
２.   실험 목적
 
３.   실험 방법
가.    실험 재료(도구)
1)      샘플
2)      시약
3)      장비
나.    실험 방법
 
４.   실험 결과
 
５.   논의 (고찰)
 
６.   참고문헌

본문내용

면역 염색법(Immunostaining)은 세포 또는 조직에서 특정 분자, 단백질 등을 항체를 이용해 가시화하는 방법으로, 특정 단백질에 선택적으로 결합하는 항체를 세포나 조직에 반응시킨 후, 항체의 결합 반응 후 그 항체의 위치를 관찰하는 생화학적인 방법이다. 면역염색법의 종류로는 면역 조직 화학 염색법 (immunohistochemistry, IHC), 면역 세포 화학 염색법 (immunocytochemistry, ICC), 면역 형광법 (immunofluorescence, IF) 등이 존재한다.
면역 조직 화학 염색법 (IHC)은 특정 타겟 단백질이 고정된 조직 내에서 발현하는지, 발현한다면 어디 위치에서 발현하는지에 대해 조직에 있는 특정 항원에 결합하는 특정 항체를 이용하여 염색하는 방법이다. IHC는 이차항체 염색 이후 발색제인 DAB 등 을 이용하여 발색하는 방법으로 보통 peroxidase에 의해 산화되어 갈색으로 발색된다. 최근에는 갈색으로 반응하는 DAB 반응 말고도 다양한 종류의 kit들이 개발되고 있다.
면역 세포 화학 염색법 (ICC)은 IHC와 거의 유사하지만, IHC가 조직을 염색하여 관찰한다는 점과는 달리, 세포를 염색하여 관찰하는 면역염색법이다.
면역 형광법 (IF)은 조직 항체의 일차 항체를 결합시키고, 형광 탐침이 부착된 2차 항체를 1차 항체와 선택적으로 결합시키는 방법으로, 형광 현미경을 통해 관찰한 시료 내에서 여러 개의 항원을 각각 가시화 할 수 있다는 장점을 지닌 실험법이다. 면역 형광법을 통해서, 조직에서의 특정 단백질의 발현위치, 발현 정도를 확인할 수 있다. IF는 IHC와 거의 유사한 프로토콜을 지니고 있는데, 차이점으로는 IHC와 달리 이차 항체로 형광이 달린 항체를 사용하며, H2O2 incubation 과정이 필요하지 않는다는 점이 존재한다.

참고 자료

어진원,임현정,Eo Jin-Won,and Lim Hyun-Jung. "생쥐 정소에서 비스페놀 에이 (Bisphenol A)가 Leydig Cell의 유전자 발현과 세포자멸사에 주는 영향." Clinical and Experimental Reproductive Medicine 35.3 (2008): 181-191.
윤선희. "형광염색법을 이용한 drosophila bax inhibitor-1의 세포사멸 조절기전 규명." 국내석사학위논문 고려대학교 생명환경과학대학원, 2011. 서울
윤철호,장병수,Yoon Chul-Ho,and Chang Byung-Soo. "방사선 조사선량에 따른 생쥐 난소의 TUNEL 염색반응에 관한 형태학적 연구." Applied microscopy 37.2 (2007): 135-142.