생명과학실험1 2주차 보고서 Buffer 제조

소개글

생명과학실험1 A+ 받은 보고서입니다.

목차

1. 실험 목표
2. Introduction
3. 실험도구
4. 실험방법
5. 결과: Buffer 제조표 1, Buffer 제조표 2
6. Discussion

본문내용

1. 실험 목표
Column Chromatography를 하기 위해 필요한 Buffer를 제조한다. Tris와 HCl 및 3차 증류수를 이용하여 pH7.4인 1M의 Tris-HCl을 제조하는 실험을 진행하였다. 1M의 Tris-HCl, MgSO4와 NaCl의 농도를 바탕으로 다양한 농도의 Elution buffer의 구성성분의 용량을 계산하였다.
2. Introduction
(1) Buffer란 무엇인가?
다양한 대사 활동이 이루어지는 생명체 내의 pH가 일정한 범위를 벗어나면, 생명을 유지하는 데에 필요한 대사과정이 일어나지 못하는 상황이 발생하게 된다. 따라서 생명체 내에서 적정한 pH를 유지하는 것이 매우 중요하다.
마찬가지로 인간의 대사과정을 연구하는 모든 실험 과정에서 사용되는 용액의 pH가 변하게 되면, 아미노산이나 바이러스 등의 다양한 실험 대상체가 파괴되거나 기능을 잃어버리는 문제가 발생한다. 따라서 실험 과정에서 다양한 용액의 혼합이 발생하더라도 허용되는 범위 내에서 pH를 유지할 수 있는 장치가 요구된다. 이 과정에서 필요한 것이 ‘완충용액’이다.
‘완충용액’이란 산이나 염기를 추가적으로 가하더라도 pH 변화에 저항하며, 공통이온효과에 따라 용액의 pH가 변화가 적은 용액을 의미한다. 완충용액은 HA⇄H++A- 의 가역적인 반응을 따르기 때문에, 약산인 HA는 OH+를 중화시키고, A-는 염기로서 작용하여 H+를 중화시킨다.
완충의 정도는 약산과 그 짝염기의 가역적 반응의 영향을 받는다. 따라서 이들이 용액 속에 존재하는 비율에 따라 pH가 변화하게 된다. Henderson-Hasselbach 방정식에 따라 약산과 짝염기의 비율이 같은 [HA]=[A-]가 될 때 pH=pKa가 되는 지점에서 가장 이상적인 완충 능력을 나타낸다.
(2) 몰농도 개념
몰농도 M(molarity)는 1L에 들어있는 분자의 몰 수로, M=mol/L 이다.

참고 자료

Steven S. Zumdahl, 2019, 줌달의 일반화학, 서울: 사이플러스.
David L. Nelson, 2013, Lehninger Principles of biochemistry, Macmillan Higher Education.
Campbell,Campbell, Neil A.,Cain, Michael L., 2011, Campbell Biology 9th, BenjaminCummings Publishing C
경희대학교 생물학과, 한양대학교 생명과학과, 2010, 일반생물학실험 = Experiments ingeneral biology, 서울: 이퍼블릭코리아(범문에듀케이션)