화공생물공학 단위조작실험1 Enzyme kinetic assay : Horseradish Peroxidase

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험목적
4. 실험 이론
5. 실험기구 및 시약
6. 실험방법
7. 실험결과
8. 고찰
9. 참고문헌

본문내용

1.실험제목: COD 측정

2.실험날짜: 2021/05/17

3.실험목적
본 실험에서는 spectrophotometer를 이용하여 HRP(horseradish peroxidase)에 의한 기질의 변화를 측정하여, 효소 반응속도론의 기본이 되는 Michaelis–Menten 방정식을 이해한다.

4.실험 이론
Michaelis–Menten 방정식
Michaelis–Menten kinetics는 생화학분야에서 가장 잘 알려진 효소와 반응속도론에 관한 모델 중 하나이다.
[S] : 기질(반응물, Substrate) S의 농도
[E] : 효소(Enzyme) E 의 농도
[ES] : 효소-기질 복합체의 농도
[P] : 생성물(Product)의 농도
Vmax : 최대 반응속도 상수
Km : Michaelis 상수
이 식을 Michaelis–Menten 식이라고 부른다.

효소 반응속도론(enzyme reaction kinetics)
단일 기질-효소 촉매반응의 속도식은 Michaelis-Menten 속도식을 기본으로 한다. 생물계에서는 다기질-다효소 반응과 같은 보다 복잡한 효소-기질간 상호작용이 일어날 수 있다. 효소는 기질과 결합할 수 있는 활성부위의 숫자가 일정하기 때문에 높은 기질농도에서는 활성부위 모두가 기질과 결합하여 효소가 포화되는 상태가 된다.
효소 반응속도론은 다음과 같이 효소(E)-기질(S)의 복합체[ES] 형성단계의 가역반응과 ES 복합체의 비가역 해리단계의 2단계의 반응체계로부터 구할 수 있다.
위 반응체계는 ES 복합체가 다소 빠른 속도로 형성되고 두번째 단계의 역반응속도를 무시한다는 가정을 전제로 한다.

참고 자료

Han, Jeong In외, 화공생물공학 기초실험 동국대학교: 화공생물공학과, 2020
Cornish-Bowden, Athel. Fundamentals of enzyme kinetics. John Wiley & Sons, 2013.