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(실험보고서)Zebrafish의 발생과정 관찰과 골격 염색을 통한 머리뼈 관찰

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최초 등록일
2024.02.08
최종 저작일
2018.05
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소개글

실험보고서 입니다.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Experiment
Ⅲ. Result
Ⅳ. Discussion

본문내용

1. Zebrafish
Zebrafish는 골격 연구로 이용되는 실험동물이다. 크기가 작고, 발달과정이 빠르며 Zebrafish의 embryo는 다른 척추동물과 달리 투명하여 내부 장기를 관찰하기 쉽다는 장점이 있어서 실험동물로 자주 쓰인다. Larval stage에는 투명하고 유전적 조작이 용이해 뼈 조직 구조와 기능에 대해 연구하기 유리하다. 성체 한 쌍은 한 번에 약 100~200개의 알을 낳으며, Zebrafish embryo는 약 24시간 이내에 몸체가 만들어지며 fertilization 후 3일 이내에 골격을 형성한다. Zebrafish는 약 26~28℃의 수조에서 키운다. embryo는 plate에 blue water를 채워, 1 plate 당 50여 마리 씩 되도록 분배하여 인큐베이터에 보관한다. 이 때 쓰이는 blue water는 fungal 성장을 억제할 수 있다.

2. 뼈 형성 과정
뼈발생은 막내골화(intramembranous ossification)와 연골속골화(endochondral ossification) 두 과정이 존재한다. 막내골화는 신경능의 mesenchymal stem cell로부터 진행된다. mesenchymal stemcell은 osteoblast로 분화하여 뼈기질의 축적을 진행하며 주로 머리뼈와 얼굴뼈를 구성한다. 연골속골화는 mesenchymal cell에서 연골세포로 분화한 뒤 증식 및 성장과정을 거쳐 뼈세포를 형성하는 과정이다. 주로 척추, 갈비, 팔다리뼈를 구성한다. 뼈는 골질에 칼슘인산염 결정을 침전시킴으로써 단단해 진다. 뼈 굵기 성장은 이미 형성된 뼈의 바깥쪽에 새 뼈가 첨가되며, 길이성장은 골단의 연골세포 증식에 의해 길이성장이 일어난다.

참고 자료

Barrett R, Chappell C, Quick M, Fleming A. A rapid, high content, in vivo model of glucocorticoid-induced osteoporosis. Biotechnol J. 2006 Jun;1(6):651-5.
de Vrieze E, van Kessel MA, Peters HM, Spanings FA, Flik G, Metz JR. Prednisolone induces osteoporosislike phenotype in regenerating zebrafish scales. Osteoporos Int. 2014 Feb;25(2):567-78. doi:10.1007/s00198-013-2441-3.
Mariotti, M., Carnovali, M., & Banfi, G. (2015). Danio rerio: the Janus of the bone from embryo to scale.
Clinical Cases in Mineral and Bone Metabolism, 12(2), 188–194. http://doi.org/10.11138/ccmbm/2015.12.2.188
Walker MB, Kimmel CB. A two-color acid-free cartilage and bone stain for zebrafish larvae. BiotechHistochem. 2007 Feb;82(1):23-8.
Scott F. Gilbert. 발생생물학 10판. n.p.: 라이프사이언스, 2015.
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