[실험보고서] 단백질 정성&정량

소개글

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목차

Ⅰ. 제목 (Title)
Ⅱ. 목적 (Object)
Ⅲ. 서론 (Introduction)
Ⅳ. 재료 및 방법 (Meterial Methods)
Ⅴ. 결과 및 고찰 (Results Discussion)
Ⅵ. 참고문헌 (References)

본문내용

우리가 실험에 사용할 정성방법인 닌히드린 반응은 아미노기를 가지는 유기물 검출에 흔히 사용된다. 닌히드린은 아미노산을 산화시켜 암모니아(NH3)와 이산화탄소를 유리시키고 알데하이드를 생성하여 자신은 환원된다. 유리된 암모아는 환원닌히드린 및 잔존하는 닌히드린과 반응하여 아미노산에 이 반응은 아미노기를 가지는 단백질, 펩티드, 아미노산에 대해 양성을 나타내며, 암모니아에 대해서도 양성반응을 나타낸다. BSA시료와는 남색, 글리신과는 짙은 남색, 달지분유와는 연보라 발색을 한다.
정성방법중의 크산토프로테인반응 역시 어떤 물질속에서 단백질이라는 영양소를 검출할때 쓰이는 반응. 즉 알아보고자 하는 물질속에 진한질산을 떨어뜨러 보아 황색으로 바뀌면 그 물질속에 단백질이 들어 있는 것이다.
뷰렛시험은 단백질 정량하는 방법중의 하나로 두개 이상의 펩티드 결합을 가지고 있는 화합물들은 알칼리성 용액에서 묽은 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성하는 특징을 이용하는 실험이다.

우리가 실험한 닌히드린은 아미노산을 검출하고 그 용액의 농도를 결정하는데 사용하는 시약이었다. 또한 미지시료(계피시료)에 들어있는 단백질 양을 구하는 시험으로 단백질 정량하는 방법중에 biuret 방법을 이용하였다. 이는 정성뿐만 아니라 정량에도 이 방법이 이용된다. 이 방법은 Kjeldlahl방법보다도 경제적이고 신속하며 간단하게 분석 할 수 있는 방법으로 Lowry방법, 자외선 흡수법, 혼탁도를 이용하는 방법보다도 색소성분에 의한 영향이 적고 측정에 영향을 미치는 물질이 비교적 적다. 이 방법은 비펩티드나 비단백질의 질소와는 반응하지 않는다. 반면 Lowry방법보다는 감도가 떨어지며 적어도 2~4mg의 단백질이 있어야 측정이 가능하다. 고농도의 암노니움염이 존재하면 반응에 영향을 미치며 단백질의 종류에 따라 색깔이 약간 변한다. 예를 들면 젤라틴의 경우 분홍색을 띤 자주빛을 보인다. 많은 양의 지방이나 탄수화물이 있므면 불투명해지기도 하며, 알려진 단백질에 의해 색이 표준화되어야 하는 단점을 안고 있다.

참고 자료

1.실험 생화학(개정3판)
한국 생화학회저
탐구당
p.197~201
2.유기화학
Harold Hart외 2인공저
교보문고
p.517~518