[생물학] [분자유전]Recombinant DNA

소개글

자세한 실험전 자료 조사와 실험 내용 설명.

목차

1. introduction
2. result
3. discussion
4. reference

본문내용

Recombinant DNA에서 akali lysis법을 이용하여 plasmid isolation을 하는 것이다. 주로 miniprep이라고 부르는 이 방법은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. 많은 세균은 염색체 이외에 플라스미드라고 불리는 크기가 작은 supercoil 형태의 원형 DNA분자를 여러 개 가지고 있다. 플라스미드 DNA는 유전자를 포함하고 있고, 대부분 플라스미드 복제에 관련되어 있으며, 염색체 복제와는 다소 독립적으로 복제되어 한 세대에서 다음 세대로 전달된다. 플라스미드는 쉽게 분리할 수 있으며, 정제된 플라스미드 DNA를 적당한 용액 내에서 원하는 숙주세포와 혼합하여 줌으로써 간단히 전이시킬 수 있다. 그리고 제한효소를 사용하여 어떤 유전자를 플라스미드 DNA에 삽입시킬 수 있다.
플라스미드에서 분리 원리는 세가지 원리에 의해 가능한데, 먼저 대장균의 염색체DNA가 플라스미드 DNA보다 크고 열이나 알카리 처리 후 얻어지는 염색체 DNA는 여러 군데가 잘려진 선상(liner DNA)인 반면 플라스미드 DNA는 원형(Circular DNA)이라는 점을 이용하여 분리하는 것이다. 그리고 EtBr 염료 결합정도 역시 원형의 DNA가 선상의 DNA보다 높다. alkali lysis method의 원리는 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA 만을 분리하는 것이다. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는

참고 자료

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