세포분자생물학 실험 레포트

소개글

세포분자 생물학 예비 레포트로 작성한 것입니다.
자연계열 학생들에게 유용할 것이라고 생각합니다.

목차

1. cDNA의 증폭을 위한 Polymerase chain reaction(PCR)
2. PCR 증폭 여부를 확인하기 위한 agarose gel electrophoresis
3. PCR 증폭한 DNA 의 elution
4. DNA와 vector 의 ligation
5. Transformation & Amplication
6. Host cell로부터 plasmid isolation
7. cloned DNA를 분리하기 위한 restriction enzyme digestion
8. cloned DNA의 확인을 위한 agarose gel electrophoresis

본문내용

1. cDNA의 증폭을 위한 Polymerase chain reaction(PCR)

PCR에 필요한 주요 재료들이다. 이들의 역할 혹은 특징에 대해 간단히 정의하시오.
1) Template DNA: 증폭 대상이 되는 DNA
2) Up-primer and down-primer: 증폭할 부분을 잡는 짧은 oligonucleotide
3) dNTP(dATP, dCTP, dGTP, dTTP): 유전자를 합성하는 재료가 되는 nucleotide들
4) Taq polymerase: 열에 특별히 강한 유전자 합성효소
PCR의 3단계이다. 단계별 특징을 설명하시오.
1)DNA 의 변성(denaturation)
90°C～96°C로 가열하여 double strand DNA(ds DNA)를 single strand DNA(ssDNA)로 분리시킨다. 높은 온도일수록 ssDNA로 잘 이행되지만 Taq DNA polymerase도 온도가 아주 높은 상태에서는 활성도가 낮아질 수 있으므로 보통 94°C로 쓴다. Cycle의 처음은 확실 변성을 위하여 약 5분간 시간을 주어야 한다.

참고 자료

인터넷 여기 저기에서 찾음