[생화학] 단백질 혼합물의 분리

소개글

생화학 실험 과정중 단백질 혼합물의 분리에 관한 실험 보고서 입니다.

목차

1. Object-용해도 차이를 이용한 단백질 혼합물의 분리

4. Regent & Apparatus

5. Theory
1. 단백질의 정제
2. 용해도 차이에 의한 단백질의 분리
3. 단백질의 변성
4. 효소 활성에 영향을 미치는 인자
5. Ammonium Sulfate 침전
6. 원심분리기
7. 투 석(Dialysis)

6. Procedure

본문내용

5. Theory

1. 단백질의 정제
용해성
수용액에 있어서의 당백질들의 용해도는 극성인 물분자들과 단백질분자들의 이온화된 원자단들 사이의 친수성 상호작용에 따라서 결정된다. 그러므로 수용액의 유전상수또는 이온의 세기를 변화시킬수 있는 시약들은 단백질의 용해도에 영향을 미칠 것이다. 단백질의 변성을 피할 수 있는 낮은 온도에서 에탄올, 아세톤 또는 황산 암모늄과 같은 염들을 첨가하면 단백질이 침전된다. 이러한 기법들을 단계Wjr으로 사용함 으로써 단백질 혼합액에 있는 단백질들을 분별침전시킬 수 있다.
2. 용해도 차이에 의한 단백질의 분리
1) 분리방법
- 등전침전(Isoelectric Precipitation)대부분의 구상 단백질의 용해도는 pH에 의해 크게 영향을 받는다. β-alobu의 용해도가 NaCl의 농도에도 불구하고 pH 5.2~5.3에서 최소임을 보여준다. 이한계 pH양쪽에서 용해도가 급격히 증가한다 이 pH를 isoelectric pH (pI)라 한다. 인느 pI에서 알짜전하가 0이어서 인접한 단백질분자간에 전기적 반발작용이 없어 서로 결합하여 침전된다. 그러나 pI이상이 되면 (혹은 그 이하) 모든 단백질 분자들의 알짜량은 같은 부호를 띄게 되어 서로 반발하여 분자들이 결합하지 않는다.

참고 자료

없음