[세포생물학 실험] 담배잎 DNA 추출

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도움이 되는 자료이길~

목차

2) Materials
3) Methods
4) Result
5) Discussion
6) Reference

본문내용

Ⅴ. Discussion

이번 실험은 담배잎의 DNA를 추출하는 것이었다. sampling 된 것을 갖고 실험에 들어갔다. sampling 된 것은 -70℃에서 보관되었다. 이 이유는 식물세포의 경우에는 lysozyme이 효과가 없어 물리적 방법(냉동시킨 시료를 갈아서 부수는 등)을 사용하거나 cellalase를 사용하여 세포벽을 파괴시켜 실험을 하기 때문이다. 즉 담배잎을 영하 70도에 보관하는 것은 급속 냉각으로 최대한 DNA의 변성이 방지된, 균질화된 시료를 얼려 분쇄하여 사용하기 위함인 것이다. (동물세포는 세포벽이 없기 때문에 detergent-씻어내는 처리만으로 쉽게 용해시킬 수 있으므로 식물에서 영하 70도가 중요한 만큼 동물세포에서는 중요하지 않다.)
얼려진 담배잎을 분쇄하여 CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide) buffer를 넣는다. 이 buffer (완충액)는 CTAB, 2-mercaptoethanol, PVP (MW 40000), Tris-HCL pH 8.0, NaCl, EDTA(Aethylenediaminetetraacetic acid) pH 8.0 의 첨가로 만들어진 것이다. 이 buffer가 필요한 이유는 식물세포의 세포벽을 약화시켜 세포의 용해과정을 통해 DNA의 추출을 용이하게 하기 위함이다.

참고 자료

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2)http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_04.php
3) http://ep.llnl.gov/bep/science/9/sMicro.html
4) http://www.edvotek.com/636.html
5) 강종백 외 2명. 유전자 크로닝 입문. 월드사이언스. 1998. pp 32~38
6) 유욱준. Bio Medical Research. 신기획. 2001. pp 2~4
7) 김영설 외 1명. 유전자 진단의 이론과 실제. 한의학. 1999. pp 30~33