[분자생물학 생물학실험] RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)

소개글

RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)실험은 친자확인부터 범죄수사까지 다양한 방면에 사용되는 실험기술입니다. 이 보고서는 RFLP의 전반적인 사항과 실험법을 다루고 있고 이 기술로 셀레늄단백질을 직접 분석해 보고 있습니다.

목차

Title
Introduction
Materials
Methods
Result
Discussion
References

본문내용

Introduction

Restriction Fragment Length Polymorphism(RFLP)는 1980년 Bostein과 그의 동료들이 제한효소(Restriction endonuclease)의 가계도를 작성하던 도중 발견한 것으로, 특정부위의 point mutation에 의해 제한효소로 절단하였을 때 생기는 절편들의 길이가 사람마다 다양하게 나타나는 현상을 말한다.(1)
실험에서 확인한 RFLP는 Sep15 selenoprotein을 암호화 하고 있는 부분으로, Sep15는 아미노산 서열 93번째에 selenocystein을 포함하고 있다.(3) 현재 sep15 gene의 811번 서열(C/T)과 1125번째 서열(G/A)에 서로 다른 2개의 polymorphism이 알려져 있는데 이들 polymorphism은 제한효소에 의한 절편 크기로 판단할 수 있다. 제한효소 DraI는 811번 위치의 T를 가진 polymorphism은 절단하지만 C를 가진 것은 절단하지 않는다. 또 BfaI은 1125번 위치의 G는 인식해서 절단하지만 A는 인식하지 못한다.(2,3) 이 두 위치의 polymorphism은 TA와 GC 두 가지만 발견되기 때문에 한 부분만 제한효소로 잘라보면 자신의 polymorphism을 결정할 수 있다.

참고 자료

1. http://dnai.co.kr/bunja/cont_bunja_15.html
2. Easwary Kumaraswamy. Andrey Malykh. Konstantin, V. K., etc. Structure-expression Relationships of the 15-kDa Selenoprotein Gene. (2000). J. Biol. Chem.. 275, 35540-35547.
3. Hu, Y. J., Korotkov, K. V., etc. Distribution and Functional Consequences of Nucleotide Polymorphisms in the 3’-Untranslated Region of the Human sep15 Gene. (2001). Cancer research. 61, 2307-2310.
4. Knekt, P., Marniemi, J., Teppo, L., Heliovaara, M., and Aromaa, . Is low selenium status a risk factor for lung cancer? (1998) Am. J. Epidemiol. 148, 975-982