[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 결과보고서

목차

1. 실험방법
2. 실험결과 및 해석
3. 고찰
4. 참고문헌

본문내용

이번 실험은 저번 실험에서 추출하고 정제한 RNA를 cDNA로 합성한 후 PCR로 증폭해 Agarose gel 전기영동으로 band를 확인해보는 실험이었다. 먼저 저번 실험에서 얻은 RNA의 농도는 EGFP(+): 367.6ng/uL, EGFP(-): 183.1ng/uL로, RNA를 1000ng으로 맞춰주기 위해 1000ng/RNA농도를 구했다. 그 결과 EGFP(+): 5.4615uL, EGFP (-): 2.7203uL를 사용하게 되었다. 이후 RT 유무와 GFP 유무에 따른 결과차이를 보기위해 5개의 샘플(GFP x + RT o, GFP x + RT x, GFP o + RT o, GFP o + RT x, NTC)을 준비한 후 dNase를 처리해 RNA에 붙어있는 DNA를 제거해주었다. 이때 DNA가 샘플에 남아있게 된다면 오차가 발생할 수 있으므로 잘 처리해야 한다. cDNA를 합성하는 과정을 진행했는데 물 NFW, dsDNase buffer, dsDNase순으로 넣었다.

참고 자료

전기영동의 원리와 실험, the Biotechnology Education company EDVOTEK