[생화학실험]RNA 추출 & cDNA 합성

소개글

"[생화학실험]RNA 추출 & cDNA 합성"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론 및 원리
1) chloroform의 역할
2) Nano drop을 이용한 핵산 정량
3) DEPC treated water
4) RAW 264.7-Mouse macrophase cell(대식세포)

3. 실험 기구 및 시약
1) RNA 추출
2) cDNA 합성

4. 실험 방법
1) RNA extraction
2) cDNA synthesis

5. 실험 결과
1) 결과 분석

6. 토의 사항
1) 실험 고찰

본문내용

1. 실험 목적
1.1. 세포에서 직접 RNA를 추출하여 보고, 추출된 RNA를 이용하여 cDNA를 합성하여 RT-PCR을 통해 특정 유전자의 mRNA 발현량을 비교한다.

2. 실험 이론 및 원리
2.1. chloroform의 역할
RNA extraction을 할 때 페놀계열 lysis buffer를 쓰게 되는데, 이후 chloroform을 넣어줌으로써 RNA가 녹아있는 수층의 페놀을 제거하여 RNA의 순도를 높여준다. pH4 정도로 낮을 때 RNA는 물과 함께 섞여있으므로 물에 남아있을 수 있는 페놀을 chloroform에 녹아들게끔 해주는 것이다. 또한 chloroform은 비극성용매여서 물에 잘 녹지 않으므로 층분리가 이루어지게 된다.

참고 자료

없음