[유전학] DNA 추출

소개글

DNA extraction 방법

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본문내용

1. DNA를 분리하고자 하는 혈액에 다음과 같은 과정을 실시한다.
Acid citrate dextrose solution B 3.5 ml가 들어 있는 시험관에 20 ml의 신선한 혈액을 받는다. 이 혈액은 0°C에서 수일간 보관하거나 혹은 -70°C에서 수개월 보관한 후 DNA를 분리하여도 무방하다. 신선한 혈액인 경우에는 1,300 xg로 15분간 원심분리하여 상층의 혈장을 제거하고 pasteur pipette을 사용하여 buffy coat를 새 시험관으로 옮긴다. Buffy coat를 20 ml의 PBS 용액으로 부유시킨 후 같은 방법으로 원심분리한 다음 반복하여 buffy coat를 분리한다. 추출용액 15 ml에 buffy coat를 부유시키고 37°C에 1시간 이상 보관해 둔다.
얼린 혈액일 경우에는 수욕에서 녹인 후 동량의 PBS 용액을 첨가하여 혼합한 다음 3,500 xg로 원심분리하여 상층액을 제거한다. 이때 적혈구는 용혈되어 상층에 존재하게 된다. 침전물을 15 ml의 추출용액에 부유시키고 37°C에 1시간 이상 보관해 둔다.

참고 자료

없음